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组织学/细胞和细胞化学定量术
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{{Hierarchy header}} 组织和[[细胞]]形态结构及其[[化学]]成分的[[定量研究]],是以量的测定及其数据变化阐述组织和细胞的生长、[[分化]]、[[代谢]]和功能的演变以及对环境因素和致病因素的反应。生命科学的研究不断深入,定量技术的应用日益广泛并有所进展。 1、[[显微镜]]分光亮度定量术此方法是应用显微分光亮度计(microspectrophotometer)测定[[组织化学]]和[[免疫]]组织化学[[染色]][[标本]]的反应强弱,进行化成分的定量分析的。基本原理是细胞内某种物质的含量不同,其染色反应的深浅不一,对一定波长的光吸收也就不同,即某物质的消亮度与一定厚度和面积内的该物质浓度成正比。通过光电组合自动控制系统将消光度转换为电信号,即可得出光密度值(O、D值),进行定量分析比较。前述[[荧光素]]染色、酶和[[核酸]]组织化学染色、[[多肽]]和[[蛋白质]]免疫组化染色、[[放射自显影]]和[[原位杂交]]等标本,均可应用[[显微分光光度计]]做定量分析。 2、形态计量术 形态计量术(morphometry)是运用数学和[[统计学]]原理对组织和细胞进行二维和三维的形态测量研究,如细胞及其微细结构成分的数量、体积、表面积、周长等的相对和绝对值的测量,其中三维立体结构的研究又称体视学(stereology)。机体组织的光镜结构计量已有不少有意义的资料,如人和动物的[[肺泡]]数量和表面积,[[肾小体]]的数量和体积比,[[肝细胞]]的体积和数量,[[胰岛]]的数量及各类细胞的数量比,[[腺垂体]]各种[[内分泌]]细胞的数量比等。通过[[组织切片]]或照片(光镜和电镜)平面图像的测量,推算其立体结构数值,传统方法是将测试系统(点、线、方格等)投影或覆盖在切片上或照片上,把若干样品的平面测量数据按数学公式推算出其立体数值。目前已广泛应用图像分析仪(image analyzer)进行形态计量研究,该仪器也是光学、电子学和计算机高技术产品,它是将切片或照片图像通过摄像机显示于监示器屏幕上,并根据不同结构的颜色深浅(灰度)及各像点的大小位置,快速准确地得出所需的各种形态数据。组织化学和免疫组织化学染色标本,也可应用图像分析仪测定其光密度值,进行定量分析。 3、流式细胞术 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近年建立的细胞分类和定量研究技术,它是应用[[流式细胞仪]](或称荧光激活细胞分类器,fluroescent activated cell sorter)对单个细胞生物化学和[[生物]][[物理]]特性进行快速定量测定的。工作原理是先分离被检细胞制成悬液,并作荧光染色或标记,使单细胞液流快速通过该仪器的激光器照射分析区,被检细胞产生的不同荧光信号转变为电脉冲,分别输入计算机内贮存,并显示于示波器屏幕上,即可获得该[[细胞群体]]中不同类型细胞的有关数据,如不同细胞的数量、荧光强度以及细胞体积、表面积和内部结构等参数;还可使细胞附有不同电荷,分类收集各种细胞,该技术的特点是速度快,精确性高,灵敏度大,已成为一种重要手段广泛用于[[细胞动力学]]、遗传学、[[免疫学]]、[[肿瘤]]学等的研究。如细胞[[DNA]],[[RNA]]或某种蛋白质的含量分析,单个[[染色体]]DNA含量及分选,[[淋巴细胞]]膜[[抗原]]或[[受体]]的分析及细胞[[亚群]]分选,[[杂交细胞]]等的分选等,也用于肿瘤[[临床诊断]]及疗效和预后的分析等。 {{Hierarchy footer}} {{组织学图书专题}}
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