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悬浮培养
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suspension culture 非贴壁依赖性[[细胞]]的一种培养方式。 细胞悬浮于[[培养基]]中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加[[悬浮培养]]规模相对比较简单,只要增加体积就可以子。深度超过5mm,需要搅动培养基,超过10cm,还需要深层通入CO2和空气,以保证足够的[[气体交换]]。 通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于[[培养液]]内的培养方法。 利用固体[[琼脂培养基]]对植物的离体组织进行培养的方法在植物遗传实验中已经得到广泛的应用。但这种方法在某些方面还存在一些缺点,比如在培养过程中,植物的[[愈伤组织]]在生长过程中的营养成分、植物组织产生的[[代谢物]]质呈现一个梯度分布,而且[[琼脂]]本身也有一些不明的物质成分可能对[[培养物]]产生影响,从而导致植物组织[[生长发育]]过程中[[代谢]]的改变而利用液体培养基则可以克服这一缺点,当植物的组织在液体培养基中生长时,我们可以通过薄层震荡培养或向培养基中[[通气]]用以改善培养基中氧气的供应。植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。这些小的细胞聚合体通常来自植物的愈伤组织。 一般的操作过程是把未分化的愈伤组织转移到液体培养基中进行培养。在培养过程中不断进行旋转震荡,一般可用100~120 r/min 的速度进行。由于液体培养基的旋转和震荡,使得愈伤组织上分裂的细胞不断游离下来。在液体培养基中的培养物是混杂的,既有游离的单个细胞,也有较大的细胞团块,还有[[接种物]]的死细胞残渣。 在液体悬浮培养过程中应注意及时进行细胞[[继代培养]],因为当培养物生长到一定时期将进入分裂的[[静止期]]。对于多数悬浮培养物来说,细胞在培养到第18~25d 时达到最大的密度,此时应进行第一次继代培养。在继代培养时,应将较大的细胞团块和接种物残渣除去。若从植物器官或组织开始建立细胞悬浮培养体系,就包括愈伤组织的诱导、继代培养、单细胞分离和悬浮培养。目前这项技术已经广泛应用于细胞的形态、[[生理]]、遗传、[[凋亡]]等研究工作,特别是为[[基因工程]]在植物细胞水平上的操作提供了理想的材料和途径。经过转化的植物细胞再经过诱导[[分化]]形成植株,即可获得携带有目标[[基因]]的个体。 [[分类:实验]][[分类:物理化学]][[分类:细胞生物学]]
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悬浮培养
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