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医学微生物学/霍乱弧菌
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{{Hierarchy header}} [[霍乱弧菌]](V.cholera)是人类[[霍乱]]的[[病原体]],霍乱是一种古老且流行广泛的[[烈性传染病]]之一。曾在世界上引起多次[[大流行]],主要表现为剧烈的[[呕吐]],[[腹泻]],失水,[[死亡率]]甚高。属于[[国际检疫]][[传染病]]。 霍乱弧菌包括两个[[生物]]型:[[古典生物型]](Classical biotype)和[[埃尔托生物型]](EL-Tor bio-type)。这两种型别除个别[[生物学性状]]稍有不同外,形态和[[免疫学]]性基本相同,在临床病理及[[流行病学]]特征上没有本质的差别。自1817年以来,全球共发生了七次[[世界性大流行]],前六次病原是[[古典型霍乱]][[弧菌]],第七次病原是埃尔托型所致。 1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新[[血清型]][[菌株]](0139),它引起的霍乱在[[临床表现]]及传播方式上与古典型霍乱完全相同,但不能被01群霍乱弧菌诊断[[血清]]所[[凝集]],抗01群的[[抗血清]]对0139菌株无[[保护性免疫]]。在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长,因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。 == 一、生物学性状== '''(一)形态与培养特性''' 新从病人分离出古典型霍乱弧菌和EL tor弧菌比较典型,为[[革兰氏阴性菌]],菌体弯曲呈弧状或逗点状,菌体一端有单根[[鞭毛]]和[[菌毛]],无[[荚膜]]与[[芽胞]]。经人工培养后,易失去弧形而呈杆状。取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察,可见[[细菌]]运动极为活泼,呈流星穿梭运动。营养要求不高,在PH8.8~9.0的[[碱性蛋白胨]]水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性[[增殖]]霍乱弧菌的[[培养基]]。在碱性平板上[[菌落]]直径为2mm,圆形,光滑,透明。 霍乱弧菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐,靛[[基质]]反应阳性,当培养在含硝酸盐及[[色氨酸]]的培养基中,产生靛基质与亚硝酸盐,在浓[[硫酸]]存在时,生成红色,称为霍乱红反应,但其他非[[致病性]]弧菌亦有此反应,故不能凭此鉴定霍乱弧菌。El Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌[[生化反应]]有所不同。前者Vp阳性而后者为阴性。前者能产生强烈的[[溶血素]],溶解羊[[红细胞]],在[[血平板]]上生长的菌落周围出现明显的透明[[溶血]]环,古典型霍乱弧菌则不溶解羊红细胞。个别El Tor型霍乱弧菌株亦不溶血。 '''(二)[[抗原性]]''' 根据弧菌O[[抗原]]不同,分成Ⅵ个[[血清群]],第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第Ⅰ群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型:含AC者为原型(又称稻叶型),含AB者为异型(又称小川型),A、B、C均有者称中间型(彦岛型)。 '''(三)[[抵抗力]]''' 霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱,EL-Tor生物型抵抗力较强,在河水、井水、海水中可存活1~3周,在鲜鱼,贝壳类食物上存活1~2周。 霍乱弧菌对热,干燥,日光,[[化学]][[消毒剂]]和酸均很敏感,耐[[低温]],耐碱。[[湿热]]55℃,15分钟,100℃,1~2分钟,水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%[[高锰酸钾]]浸泡[[蔬菜]]、水果可达到[[消毒]]目的。在正常胃酸中仅生存4分钟。 == 二、致病性和[[免疫性]]== '''(一)致病性''' 人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一[[易感者]],主要通过污染的水源或饮食物经口传染。在一定条件下,霍乱弧菌进入[[小肠]]后,依靠鞭毛的运动,穿过粘膜表面的[[粘液层]],可能藉菌毛作用[[粘附]]于肠壁上皮[[细胞]]上,在肠粘膜表面迅速繁殖,经过短暂的[[潜伏期]]后便急骤发病。该菌不侵入肠[[上皮细胞]]和肠腺,也不侵入血流,仅在局部繁殖和产生霍乱[[肠毒素]],此[[毒素]]作用于不粘膜上皮细胞与肠腺使肠液过度分泌,从而患者出现[[上吐下泻]],泻出物呈“米泔水样”并含大量弧菌,此为本病典型的特征。 霍乱肠毒素本质是[[蛋白质]],不耐热,56℃经30分钟,即可破坏其活性。对[[蛋白酶]]敏感而对[[胰蛋白酶]]抵抗。该毒素属[[外毒素]],具有很强的抗原性。现已能将该毒素高度精制成晶状,仍保持极强的[[生物学]]活性。 霍乱肠毒素[[致病机理]]如下:毒素由A和B两个[[亚单位]]组成,A亚单位又分为A1和A2两个肽链,两者依靠二硫链连接。A亚单位为[[毒性]]单位,其中A1肽链具有[[酶活性]],A2肽链与B亚单位结合参与[[受体]]介导的[[内吞作用]]中的转位作用。B亚单位为结合单位,能特异地识别肠上皮细胞上的受体。1个毒素[[分子]]由一个A亚单位和4℃6个B亚单位组成[[多聚体]]。霍乱肠毒素作用于肠[[细胞膜]]表面上的受体(由[[神经节苷脂]]GM1组成),其B亚单位与受体结合,使毒素分子[[变构]],A精致单位进入细胞,A1肽链[[活化]],进而激活[[腺苷]][[环化酶]](AC),使[[三磷酸腺苷]]([[ATP]])转化为环磷酸腺苷(cAMP),细胞内cAMP浓度增高,导致肠粘膜[[细胞分泌]]功能大为亢进,使大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻,由于大量[[脱水]]和失盐,可发生[[代谢性酸中毒]],血[[循环衰竭]],甚至[[休克]]或死亡。 '''(二)免疫性''' 患过霍乱的人可获得牢固的免疫力,再[[感染]]者少见。病人在发病数日,[[血液]]中即可出现[[特异性抗体]],7℃14天[[抗体滴度]]达高峰,随后逐渐下降至较低水平,但能持续约3个月外。病后小肠内可出现分泌型lgA。[[体液抗体]]与[[免疫]]的关系尚不清楚,一般认为局部SlgA可在肠粘膜与病菌之间形成[[免疫屏障]],有阻断粘附和中和毒素的作用。 == 三、[[微生物学]]诊断== 由于霍乱流行迅速,且在流行期间[[发病率]]及死亡率均高,危害极大,因此早期迅速和正确的诊断,对治疗和预防本病的蔓延有重大意义。 '''(一)直接[[镜检]]''' 采取病人“米泔水样”[[大便]]或呕吐物。镜检([[涂片]][[染色]]及悬滴法检查)观察细菌形态,动力特征。 '''(二)[[细菌分离培养]]''' 可将材料[[接种]]至碱性蛋白胨水37℃培养6~8小时后,取生长物作形态观察,并转种于碱性平板作分离培养,取可疑菌落作玻片凝集,阳性者再作生化反应及生物型别鉴定试验。 '''(三)特异性[[制动试验]]''' 取检材或新鲜碱性蛋白胨水[[培养物]]一滴,置于[[载玻片]]上,再加霍乱弧菌多价诊断血清,加盖玻片,用暗视野镜观察,3分钟内运动被抑制的即为阳性,此法优点是快速而特异操作简便,但必须有数量较多的弧菌才检出。 '''(四)[[免疫荧光试验]]''' 除一般[[免疫荧光]]法外,还可用荧光[[菌球]]法检查。 == 四、防治原则== 必须贯彻预防为主的方针,作好对外交往及入口的[[检疫]]工作,严防本菌传入,此外应加强水、粪管理,注意饮食卫生。对病人要严格[[隔离]],必要时实行[[疫区封锁]],以免[[疾病]]扩散蔓延。 人群的[[菌苗]][[预防接种]],可获良好效果,现用加热或化学药品杀死的古典型霍乱菌苗皮下接种,能降低发病率。这种苗菌对EL-Tor 型霍乱弧菌感染也有保护作用,但持续时间短,仅3-6个月。近年来,有使用口服菌苗(大剂量、反复服用),[[类毒素]]及类毒素与死菌的[[混合疫苗]]等,这些尚待现场验证,才能下结论。 治疗主要为及时补充液体和电解质及应用[[抗菌药物]]如[[链霉素]]、[[氯霉素]]、[[强力霉素]]、[[复方]]SMZ-TMP等。 ==参看== *[[霍乱弧菌]] {{Hierarchy footer}} {{医学微生物学图书专题}}
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