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{{百科小图片|bkbvb.jpg|[[血清]]}}血清,指[[血液凝固]]后,在[[血浆]]中除去[[纤维蛋白]]分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供[[激素]]和各种[[生长因子]]、提供[[结合蛋白]]、提供促接触和伸展因子使[[细胞]]贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。 ==血清类别== {{百科小图片|bkbvc.jpg|胎[[牛血清]]替代品}}胎牛血清 、[[透析]]型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、[[干细胞]]培养胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、[[活性炭]]/[[葡萄糖]]处理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生牛血清 、加强型小牛血清 、补铁小牛血清 、成牛血清 、[[供体]][[马血清]] 、[[兔血]]清 、[[鸡血]]清 、[[猪血]]清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。 ==主要成分== 血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、[[生理]]条件和营养条件不同而异。血清中含有各种[[血浆蛋白]]、[[多肽]]、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是: 第一:血清的成份可能有几百种之多,目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和[[脂类]]等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难; 第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制; 第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。 ==鉴别方法== ===血清=== 血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将[[血液]]自[[血管]]内抽出,放入[[试管]]中,不加抗凝剂,则[[凝血]]反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,[[纤维蛋白原]]转变成纤维[[蛋白]]块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,[[血小板]]释放出许多物质,各[[凝血因子]]也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如[[凝血酶原]]变成[[凝血酶]],并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多[[化学]]成分的分析,都以血清为样品。 ===血浆=== {{百科小图片|bkbvd.jpg|血液成分}}血浆是血液的液体成分,[[血细胞]]悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及[[二氧化碳]]。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。 将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。 ==主要作用== ●提供基本营养物质:[[氨基酸]]、[[维生素]]、无机物、脂类物质、[[核酸]][[衍生物]]等,是细胞生长必须的物质。 ●提供激素和各种生长因子:[[胰岛素]]、[[肾上腺皮质激素]]([[氢化可的松]]、[[地塞米松]])、[[类固醇激素]]([[雌二醇]]、[[睾酮]]、[[孕酮]])等。生长因子如[[成纤维细胞生长因子]]、[[表皮生长因子]]、[[血小板生长因子]]等。 ●提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地[[低分子量]]物质,如[[白蛋白]]携带维生素、脂肪、以及激素等,[[转铁蛋白]]携带铁。结合蛋白在细胞[[代谢]]过程中起重要作用。 ●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。 ●对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如[[内皮细胞]]、[[骨髓]]样细胞可以释放[[蛋白酶]],血清中含有[[抗蛋白酶]]成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止[[胰蛋白酶]]的[[消化]]作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于[[贴壁细胞]]的消化[[传代]]。[[血清蛋白]]形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在[[悬浮培养]]搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些[[微量元素]]和离子,他们在代谢[[解毒]]中起重要作用,如SeO3,硒等 ==常见问题== ===保存血清最好的方法?=== 血清应保存在-5C至-2OC。然而,若存放于4C时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将[[无菌]]分装血清至恰当的[[灭菌]]容器内,再放回[[冷冻]]。 ===如何解冻血清才不会使产品质量受损?=== 将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。 ===如何避免沉淀物的产生?=== 1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。C至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C),实验显示非常容易产生沉淀物。 2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生 3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 5、若必须做血清的热灭活,请遵守56。C,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌[[离心管]]内,以400g稍微离心,[[上清液]]即可接着加入[[培养基]]内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。 ===何谓热灭活?=== 一般是以56C,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使[[补体]]去[[活化]],而补体所参与的反应有:溶细胞活性,[[平滑肌]]的收缩,[[肥大细胞]]和血小板[[组胺]]的释放,增强[[吞噬作用]],[[淋巴细胞]]、[[巨噬细胞]]的趋化和激活。 ===有必要做热灭活吗?=== 实验显示,经过正确处理的热灭[[活血]]清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立[[显微镜]]下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37C环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂[[扩增]]。 因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!另外,购买已灭活成品也不失一个捷径,请在购买的时候注意询问厂家是否是已灭活血清。 [[分类:生物学]][[分类:分子生物学]]
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