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实验诊断
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'''实验诊断'''(laboratory diagnosis),通过感官观察、[[试剂]]反应和仪器分析等对离体[[标本]]如[[体液]](血、[[组织液]]、[[脑脊液]]等)、分泌物([[唾液]]、胃液等)、[[排泄物]](痰、汗、尿、粪等)和脱落物(脱落的[[细胞]]、组织等)进行检查,为[[临床诊断]]、病情判定、疗效观察以及预后估计提供实验依据的一种诊病方法。[[实验诊断]]涉及许多基础和临床学科,是[[现代医学]]的重要组成部分。随着新技术、新方法在实验诊断中的应用,临床检验的范围逐渐扩大,项目日益增多,敏感性、特异性和准确性也显著提高,并已发展为一门独立的医学学科──实验诊断学。 实验诊断虽然在临床诊断中占重要地位,但实际应用中,因检测方法的灵敏度和特异性各不相同,诊断价值也不一样。加之,不同疾病的同一项目检查结果可以很相近;而在同一种疾病,因病情和病期的不同,同一项目的检查结果则可有很大差异。所以必须结合临床实际情况,对检查结果进行分析、解释才能得出合理的判断。 ==实验诊断的主要内容== 可大致分为八类。 ===临床一般检查=== 指对血、尿、粪、痰、各种[[穿刺]]液和分泌物的常规性检查,包括外观[[物理]]性状、一般[[化学]]定性反应,[[染色]]或不染色的有形成分[[显微镜]]下观察等。 ===临床[[血液]]学检查=== 包括[[血细胞生成]]动力学、形态学和[[组织化学]]检查,[[出血]]、[[凝血]]、[[纤维蛋白]]溶解和[[溶血]]机理检查以及[[卟啉]]、[[血红素]]、[[血红蛋白]]和[[异常血红蛋白]]检查等。 ===临床化学或[[临床生物化学]]检查=== 包括体液的电解质和[[微量元素]]检查,[[脂肪]]、糖和[[蛋白质]]及其[[代谢]]产物检查,[[激素]]及[[内分泌]]功能检查,[[酸碱平衡]]及血气检查,[[维生素]]检查,脏器功能检查,毒物检测及[[药物浓度]]监测等。 ===临床[[微生物学]]检查=== 包括各类[[致病性]]及条件致病性[[微生物]]的形态、染色、培养、[[生物化学]]反应、对药物的敏感性、动物实验和[[免疫血清]]学检查等。 ===临床[[寄生虫]]学检查=== 包括各种寄生虫的成虫、幼虫及虫卵的形态、动物实验和免疫血清学检查等。 ===临床免疫[[血清学检查]]=== 本类试验初期仅用于以[[抗原]]-[[抗体反应]]为原理的[[血清]]微生物学检查,称为血清学检查。随着[[免疫学]]研究的进展,血清学检查已成为免疫学中的一个内容,称为免疫血清学检查。除微生物和寄生虫的免疫血清学检查外,尚包括特异性和[[非特异性免疫]]功能检查,检查内容包括各种[[免疫活性细胞]]、[[淋巴因子]]、[[白细胞介素]]、[[免疫球蛋白]]及其肽链和片段,[[人类白细胞抗原]]、[[淋巴细胞转化试验]]、[[玫瑰花]]环试验、[[白细胞]]移动抑制试验等[[细胞免疫]]功能检查。 ===[[临床遗传学]]检查=== 主要是检查[[染色体]],包括染色体镜形态结构的识别检、[[核型分析]]、带型分析等。 ===临床脱落[[细胞学]]检查=== 包括各种组织的脱落物、分泌或渗出物,冲洗物和各种体液如血、尿、[[胆汁]]、胃液和创口脓液的直接或沉渣[[涂片]]以及手术切除物和穿刺物、组织块涂片或印片细胞学检查等。 ==实验诊断的价值== 实验诊断主要为临床医学服务,随着[[医学模式]]的转变,也增加了为[[预防医学]]服务的倾向。其意义可归纳为以下几点。 ===疾病的诊断和鉴别诊断=== 拟定诊治计划,鉴别疾病,判定病情和预后,发现[[并发症]]等提供依据。 ===社会调查=== 帮助了解社会卫生状况及人群健康情况,为制定卫生条例和法规、保健、环境保护措施,设置卫生机构提供基础性资料。 ===防病调查=== 帮助发现[[遗传性疾病]]、[[传染性疾病]]以及各潜在性疾病和损害人体健康因素等。 ===个人健康咨询=== 定期健康检查时也要进行一些项目的实验检查。协助生活指导作为健康与生活指导的依据。 ==标本== 是实验诊断检查的对象。检验的结果准确与否,首先依靠于采集标本、转送标本以及保管标本是否得当。标本应随时采集随时送检,尤其是排泄物、分泌物和穿刺物等类标本对时间的要求更为严格。接到标本后应立即检查或即对标本作适当处理,如将血清或[[血浆]]分离出置4℃冰箱保存等。 ===[[血标本]]=== 血液内容受机体代谢及生物钟影响较大,血标本的采集时间因检查目的的不同而异:①[[空腹]]血。指进食后8小时的血,一般多在晨起饭前采血。用于临床化学检验项目。可较少受饮食性质和量的干扰和日间[[生理]]活动的影响,也利于对同一种体某一项目的前后检查结果做比较。②指定时间血标本。即按限定时间采集的血标本。多用于功能试验或检出血中某些有一定周期波动的成分,前者如[[葡萄糖耐量试验]],后者如有昼夜变化规律的血中[[皮质醇]]。③急诊标本。根据病情随时采集,送检时要注明采血时间。 血标本又可依检查项目的不同而分为全血、血浆和血清三种。为得到全血和血浆,采血须根据检查目的的不同加入不同抗凝剂。常用的抗凝剂有:①草酸钾和草酸钠,二者可与[[凝血因子]]钙离子形成不解离的草酸钙,起[[抗凝作用]]。常用于[[酶学检查]]以外的[[生化]]检查,这是由于此类抗凝剂对多种酶有抑制作用,因草酸钾能使[[红细胞]]缩小,钠盐能使之膨大,故检查红细胞压积时需用二者混合的抗凝剂。②[[肝素]]。可抑制[[凝血酶原]]转化为[[凝血酶]],除某些凝血机理检查外,应用甚为广泛,但价格较贵。③乙二[[四乙酸]]二钠,通过与钙离子络合起抗凝作用。④[[柠檬酸钠]]([[枸橼酸钠]])机理同草酸盐。常用于血液学检验。采集量要适宜,如血培养要求标本与[[培养液]]的比例为1:10,[[血量]]过大导致培养液相对减少,反而不利于[[细菌]]生长。作为抗凝血标本的容器中都预放有定量的抗凝剂,标本过多,超过抗凝量,易使标本凝固,无法进行检查。 标本容器一定要干燥、洁净,抽血用的[[注射器]]内芯也不应潮湿带水,以免出现溶血。[[细菌培养]]标本的容器必须按[[无菌]]要求[[灭菌]]。 ===尿标本=== 尿的性状和成分不仅可直接反映[[泌尿系统]]有无器质性或功能性改变,对其他系统情况的估测也极有意义。做定性检查可随时收集尿液,但以晨起第一次排出的尿为最佳,因此次尿较浓缩,[[比重]]高,有形成分的形态能保持完整。进行功能试验则应按要求时间采集尿液。必须留24小时尿时,标本瓶中应预放入[[防腐剂]],以防微生物繁殖。 ===粪标本=== 宜用新鲜排出的粪便,选取有脓、血、粘液等成分的部分。一般检查留少量粪便即可,容器一般用涂蜡纸盒。计数寄生虫成虫及蚴时要留24小时粪便。 ==准确和误差== 实验诊断检查的目的是测出标本中的某些物质的真正含量,即真值。在实际工作中,由于多种因素的影响,测得值往往与真值不完全相符。测得值与真值接近则称准确,测得值与真值之差称为误差。因为在实际工作中,真值常是未知数,所以都是用样本均数来估计,测得值与均值之差称偏差也属误差。误差分为:①[[系统误差]],是由一定原因产生的,属可测性误差,有一定规律性、系统性和倾向性,所测结果可全部过低或过高,常见的原因是量容器偏大或偏小、试剂不纯、标准物过高或过低、仪器设计偏差、检验方法固有缺点或操作者的不良习惯等。可以通过改正或纠正以上问题来减少或防止系统误差的出现。②[[随机误差]],由无法控制的因素所引起,无规律性倾向性或系统性,其原因是偶然的,不能预测,如大气中温度、温度的微小变动,电流、电压的波动、仪器的不稳定等等。随机误差是不可避免的,也是不能控制的。③过失误差,是由于检测者的粗疏和错误造成的,这是不允许的,必须坚决克服的。 准确和误差是一对矛盾,相互对立又共同存在,应科学地规定误差范围。这种误差称为“允许误差”。 ==影响和干扰实验诊断检查的因素== 实验诊断检查除具有一般[[实验室检查]]的技术性误差外,还存在一些特有的影响和干扰因素。 ===生理性影响=== 可以表现为个体自身、个体间、人群和地区之间的差异。这些因素有[[遗传]]([[人种]]、民族和家族等)、生活和环境(地区、职业、生活习惯、嗜好、饮食、姿势、居住条件、劳动与运动方式和程度、精神状态和[[采集标本]]的部位)、时间(年龄、日内差、日间差和季节差)、性别(性别以及[[月经]]、[[妊娠]]、[[性周期]]等)。这些因素对检验的影响大小不一,一般引起正常范围内的波动,这些波动多数有一定规律性,检查项目不同变化幅度也各有不同,有时能超出生理界限。 ===药物的干扰=== 很多药物可以干扰实验诊断检查的结果,常造成试验的[[假阳性]]或[[假阴性]],使实验结果不能反映机体的真实情况。 ①直接干扰。进入机体的许多药物随标本被收集,可以直接参与检查反应,影响检查过程,如抑制酶活性,影响氧化或还原反应等。有些药物含有待测项目成分(如输钾时测血钾结果就不准确)。有些药物虽不直接影响反应,但其颜色、理化性质与被测物质接近,也能影响检查结果,有的药物的代谢产物也能干扰检查。细菌培养时常因应用大剂量[[抗生素]]而出现假阴性。 ②间接干扰。有两类情况:一类是药物刺激或抑制组织或脏器活动影响检查结果,如应用升糖激素后血[[葡萄糖]]升高;一类是药物损伤组织或脏器引起功能变化,如药物性肝、[[肾功能]]障碍等。 ==实验诊断的正常值== 实验诊断的首要步骤是判定被检标本的检测值是否正常。为此各项检查都应有判定的标准,即正常范围或简称正常值或参考值。定性试验的结果一般以阴性或阳性反应表示。用物理量表达的试验结果就必须有明确的数值。 机体生理成分的正常值都是通过[[统计学]]方法得来的,[[病理]]性产物或非生理性成分的出现均属异常,故无正常值,或正常值为零。但随着人们对机体认识的深化,检查方法与手段的改进,以及试验敏感性的提高,过去认为正常人体内没有的物质或病理性产物,现在发现也有微量存在,从而成为人体固有的生理成分,如某些微量元素、[[胎儿]]甲种蛋白等。所以检验正常值包括的项目范围正在扩大。 实验诊断检查项目正常值的分布频率有正态(包括对数正态)和[[偏态分布]]两类,后者又有正和负偏态两种,即结果分布偏于平均值的一侧。[[正态分布]]是以平均值为中心向两侧呈古钟形分布。绝大多数项目的结果高或低于正常值都有临床意义。少数项目则仅单侧(即高或低值)有临床价值,如大多数存在于细胞内的酶,血中正常值很低,若该酶存在的组织或脏器损伤,释放入体液[[酶活性]]便升高。 绝大多数正常人的测定值都在正常值范围内。多数检查项目的正常值范围,定为[[抽样]]标本测定值的平均值(M)加减1.96倍[[标准差]](SD),即M±1.96×SD,此范围能包括95%正常人的测定值。余 5%的正常人可高于或低于正常值。 正常值是检查正常人即健康人而得到的。何谓正常人无统一定义,系指由医师询问既往史和现病史,进行体检,再进行常规性检查,如 [[X射线]]胸腹透视,心电描记,[[血压]]与[[体温]]测定,血、尿、粪常规及[[肝功能]]检查无异常者,既往仅患过人群普遍易患的[[感冒]]、[[麻疹]]、[[呼吸道]]及[[皮肤感染]]或与被检项目无直接关系的疾病亦可列为正常状态。按上述要求选择一般人群中符合条件的也仅有2/3。 现在所用的正常值都是人群正常值,而临床上要衡量某个个体是否正常,故人群正常值有其局限性,如有些人的某些项目用人群正常值衡量可能属于正常范围,但就被检者来说已为异常。在个人连续健康检查或日常检查中可获得相应项目的个人正常值,用它衡量此人患病时的检查结果其临床意义更为确切。 临床中常出现略高或略低于正常值的结果(这实际是指M±2×SD~M±3×SD之间的值),它可能属于5%的正常人,也可能是异常值,称为限界值。判定时其意义首先应排除技术误差、标本处理不当、生理过度影响和药物干扰,然后再分析它的临床意义,这对及时发现早期、隐匿型及[[潜伏期]]患者很有意义。 ==实验诊断的发展及趋向== 实验诊断的方法和设备更新很快,总的发展方向是检测准确、快速、简便和实用。 ===自动、快速和微量=== 20世纪50年代以来实验诊断项目大量增加,出现了代替手工操作自动化仪器,使工作效率大大提高,而且保证了检查质量,减少了标本用量。实验诊断仪器发展很快,种类繁多,机型不断改进,现在多数仪器都由微机控制,编有固定或可变程序,结果可用荧光屏显示和打印,操作采用人机对话方式,使用很方便。 ===仪器专业化,检验组合配套=== 根据临床工作的要求,将有关的项目组合配套,设计出专业性较高的检测仪器,如[[血细胞]]检查仪能将血细胞检查的主要项目一次测出,最多达20项,电解质分析仪能测定体液中的阴离子和阳离子,并将阴离子间隙一并报出。另外尚有[[凝血检查]]仪、[[肾功能检查]]仪、[[血气分析仪]]、蛋白质检查仪、[[免疫化学]]分析仪[[和凝]]血检查仪等。 ===简易化和床边化=== 由于物理、化学、免疫学、酶学和高科技的进展,出现了许多准确性好、灵敏度高的仪器和试剂,可以使过去繁琐复杂的分析过程简易化,如选择性[[电极]]法测定pH、氧和电解质。干化学检查法发展很快,将很微量的血、尿直接滴于吸附有试剂的[[试纸]]条上,送入机器即可显示测定结果,这样不仅可在医院检查标本,病人也可在家中或床边检测。 见[[血液常规检查]]、[[粪便检查]]、[[尿分析]]、酶学检查。 参考书目 叶应妩:《临床实验诊断学》,人民卫生出版社,北京,1989。
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