查看“基因诊断与性病/支原体性感染症”的源代码

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[[生殖器]][[支原体]]（Mycoplasmasemtalium）[[感染]]是近年新明确的一种[[性接触传播]][[疾病]]。

'''一、[[病原学]]'''

支原体（Mycoplasmal）是目前所能发现的能在无生命培基中生长繁殖的最小的[[微生物]]。它广泛分布于自然界，有80余种，与人类有关的支原体有[[肺炎支原体]]（M-pneumonie，Mp）、人型支原体（M.humenis，MH）、[[解脲支原体]]（Ureaplasma urealyticum，[[UU]]）和生殖器支原体（M.genitalium，MG），前者引起[[肺炎]]，后三者引起泌尿生殖道感染。支原体体形多样，基本为球形，亦可呈球杆状或丝状，其[[菌落]]呈针尖大小，故又称之为微小支原体。支原体特点是无细胞壁及[[前体]]，[[细胞器]]极少。[[DNA]]的G+C含量低，菌体内具有非常小的[[染色体组]]，其[[分子量]]约为45×108，菌体[[细胞]]大小约为0.2-0.3μm，很少超过1.0μm。由三层[[蛋白质]]和[[脂质]]组成的膜样结构以及一层类似[[毛发]]结构组成。支原体由[[二分裂]]繁殖，形态多样。支原体用普通[[染色]]法不易着色，用姬姆萨染色很浅，[[革兰染色]]为阴性。支原体可在鸡胚[[绒毛]][[尿囊]]膜上或[[细胞培养]]中生长。用[[培养基]]培养。营养要求比[[细菌]]高。由于它没有[[细胞壁]]，因此对影响细胞壁合成的[[抗生素]]，如[[青霉素]]等不敏感，但[[红霉素]]、[[四环素]]、[[卡那霉素]]、[[链霉素]]、[[氯霉素]]等作用于[[核蛋白体]]的抗生素，可抑制或影响支原体的[[蛋白质合成]]，有杀伤支原体作用，支原体对热[[抵抗力]]差，通常55℃经15分钟处理可使之[[灭活]]。石碳酸，[[来苏儿]]易将其杀死。在培养基中置入脲素并以[[硫酸]]锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。

'''二、[[流行病学]]'''

由于诊断条件所限和命名上的问题。国内尚无系统的人群调查资料，支原体可存在于健康[[携带者]]，而在性乱者、同性恋、妓女、[[淋病]]患者中检出率较高，我国报道7个地区健康人携带率为解脲支原体（UU）占10.59%，人型支原体（MH）占5.34%。性乱者UU的检出率为71.7%，MH为19.57%。调查表明，性伴数越多，性活跃指数越大，UU和MH[[感染率]]越高。

'''三、[[传播途径]]'''

成人主要通过性接触传播，[[新生儿]]则由母亲[[生殖]]道[[分娩]]时感染。成人男性的感染部位在[[尿道]]粘膜，女性感染部位在宫颈。新生儿主要引起[[结膜炎]]和肺炎。

'''四、发病机理与[[免疫]]'''

支原体只能[[粘附]]在[[呼吸道]]或泌尿生殖道的[[上皮细胞]]表面的[[受体]]上，而不进入组织和[[血液]]。支原体引起细胞损害的原因为：粘附于[[宿主]][[细胞表面]]的支原体从细胞吸收营养，从[[细胞膜]]获得脂质和[[胆固醇]]，引起细胞损伤；支原体[[代谢]]产生的有毒物质，如溶[[神经]]支原体能产生[[神经毒素]]，引起细胞膜损伤；脲原体含有[[尿素酶]]，可以水解[[尿素]]产生大量氨，对细胞有毒害作用。支原体除可以粘附于细胞、[[巨噬细胞]]表面外，还可以粘附于[[精子]]表面，从而阻止精子运动，其产生[[神经氨酸酶]]样物质可干扰精子与[[卵子]]的结合。这就是[[支原体感染]]引起[[不育]][[不孕]]的原因之一。

在动物实验发现，小鼠腹腔巨噬细胞可以杀灭支原体，而[[中性粒细胞]]的作用不大。在体外，IgG1和IgG2[[抗体]]有调理作用。可加强巨噬细胞对支原体的杀伤作用。

'''五、[[临床表现]]'''

[[潜伏期]]为1-3周，典型的[[急性期]][[症状]]与其他非淋病性生殖[[泌尿系统]]感染相似，表现为尿道刺痛，不同程度的[[尿急]]及[[尿频]]、[[排尿]]刺痛，特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度[[红肿]]，分泌物稀薄，量少，为浆液性或脓性，多需用力挤压尿道才见分泌物溢出，常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口，或见污秽裤裆。约有三分的病人可无任何自觉症状。只是在例行检查时才被发现。50%病人初诊被忽略或误诊，约有10%-20%的患者同时有[[淋球菌]]双重感染。

[[亚急性]]期常合并[[前列腺]]感染，患者常出现[[会阴]]部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时有自会阴向股内侧[[发散]]的[[刺痛感]]。肛诊时前列腺纵沟不明显或表面类似[[核桃]]壳凹凸不平，少数病例B型[[超声波]]诊断可证实不同程度的增大。合并副睾炎者不多见。

女性患者多见以[[子宫颈]]为中心扩散的生殖系[[炎症]]。多数无明显自觉症状，少数重症病人有[[阴道]]坠感，当感染扩及尿道时，尿频、尿急是引起病人注意的主要症状。感染局限在子宫颈，表现为[[白带]]增多、混浊、[[子宫颈水肿]]、[[充血]]或表面[[糜烂]]。感染扩及尿道表现为尿道口潮红、充血、挤压尿道可有少量分泌物外溢，但很少有[[压痛]]出现。

支原体感染常见的[[合并症]]为[[输卵管炎]]，少数患者可出现[[子宫内膜炎]]及[[盆腔炎]]。

'''六、诊断及鉴别诊断'''

（一）[[临床诊断]]

有不洁[[性交]]史，有尿道、[[阴道分泌物]]及排尿[[灼痛]]表现者而又排除其他[[病原体]]感染的可能性，取尿道或宫颈分泌物[[涂片]]，在1000倍[[显微镜]]下可见[[多形核白细胞]]≥5个，可作初步诊断。

（二）实验诊断

支原体感染的[[实验室诊断]]主要是支原体的培养和[[血清学鉴定]]，目前主要采用[[基因诊断]]。

1．支原体培养：

a．[[采集标本]]，一般为泌尿生殖试子或刷片，少数取前列腺液，[[精液]]、[[关节液]]，或取[[输卵管]]，[[直肠]]活检物，近年来用初段尿[[标本]]离心物，以取代尿道拭子。拭子取材时，将拭子插入[[男性尿道]]2-4cm，用力擦取。该方法容易造成[[尿道损伤]]及[[继发感染]]。用时须慎重。女性则需先清洁宫颈鳞状与柱状[[上皮]]结合部，用细胞刷收集宫颈标本，能增加感染细胞的数量，较棉拭子敏感性高。

b．常用培养基为牛心浸液或[[蛋白胨]]，并含1%新鲜[[酵母]]浸液，10-20%动物[[血清]]及0.5%[[氯化钠]]，还可加[[葡萄糖]]和[[精氨酸]]以促进MH和MG生长，加入尿素以供UU代谢，适量加青霉素抑制杂菌。

2．血清学鉴定法：最常用的是[[琼脂]]扩散法，即将支原体[[接种]]到琼脂皿上。然后再用浸过适量血清的滤纸放到琼脂表面，观察哪一种能抑制支原体生长。也可用琼脂表面的菌落作[[荧光抗体]]染色法，用落射[[荧光显微镜]]观察，此法的优点是可以利用最初生长在琼脂表面上的菌落而不必将支原体[[传代]]。

[[血清学诊断]]试验：[[酶联免疫吸附试验]]（ELISA）敏感性高：微量[[免疫荧光]]法（MIF）具有快速特点。

3． 基因诊断：利用DNA[[探针]]对支原体诊断其敏感性稍差，但特异性高，用[[聚合酶链反应]]（PCR），敏感性、特异性均高。具体检测方面如下：

（1）标本处理

1．取材部位为[[子宫颈管]]，男性为尿道，将[[灭菌]]白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本[[缓冲液]]中。

2．解脲脲原体DNA提取：

将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5%NP-40、0.5%Tween20，1%SDS和2mg/ml[[蛋白酶]]K的TES缓冲液（50mmol/l Tris-HCl，50mmol/L NaCl，100mmol/ L EDTA，pH 8.0），置37℃裂解60 min，沸水5min，酚，[[氯仿]]抽提DNA[[乙醇]]沉淀，沉淀物溶于20μl TE缓冲液(100mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA，pH 8.0)。

（2）[[引物]]设计

引物来源于解脲脲原体，[[脲酶]][[基因]]序列：

UU1：CAGATACATTAAACGAAGCAGG（1613-1635）

UU2：GTGGTGACATACCATTAAC（1837-1819）

（3）PCR[[扩增]]

传统的方法为的反应体积为100μl，含5x反应缓冲液20μl和FD-DNA[[聚合酶]]2μ、4种dNTP各200μmol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0.5ml[[离心管]]，-20℃备用。临用加模板DNa 2μl，短暂离心，加100μl矿物油覆盖。现在[[试剂]]已商品化，反应体积为25μl，单管已分装好，只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s(第一次循环变性2min)，55℃退火30s和72℃延伸40s（最后一次循环72℃，延伸5min）三个步骤。每次扩增均应作[[阴阳]]性对照。

（4）扩增产物的检测

1．1.5%[[琼脂糖凝胶电泳]]检测：取10u lPCR扩增物作1.5%琼脂糖凝胶电泳、0.5μg/ml溴化乙锭染色，以PGEM-3Zf（+）DNA-Hae Ⅲ为分子量标准，置紫外透射仪观察结果。

2. 治疗：治疗基本同[[衣原体]]治疗。[[强力霉素]]100mg口服，每日2次，连服7-14天或[[阿齐霉素]]1g，[[单剂量]]口服，半衰期长达60小时，一次口服，可维持有效浓度5天；氟嗪酸0.2，口服，每日2次，连服7-14天。
==参看==
*[[支原体性感染症]]
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