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临床生物化学/细胞调节因子实验室检测的简介
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{{Hierarchy header}} 研究[[细胞因子]]在各种[[病理]]生理情况下的活动、分泌以及在治疗中使用细胞因子制剂的效应,都要求能有效地检测体内细胞因子的含量(浓度水平),以及检测细胞因子的功能([[生物]]效应)。 从前以细胞因子的[[生物学]]特征作为其含量分析的基础,[[免疫]]分析及其它[[免疫化学]]或生物化学技术亦可用于此细胞因子的测定和部分鉴定,表2-14总结了已用于细胞因子功能测定和浓度(含量)测定的方法。 表2-14 细胞因子分析 {| class="wikitable" | 生物分析 | [[酶联免疫]]吸[[附分]]析(ELISA) |- | 动物分析 | 其它 |- | [[增殖]]分析 | [[受体]]结合分析 |- | [[骨髓]][[集落]]形成分析 | 免疫化学程序 |- | [[细胞毒性]]或[[细胞]]稳定性分析 | 细胞或细胞中的测定 |- | 抗病毒分析 | [[匀浆]]生物分析或免疫分析 |- | 次级[[分子]]分泌的诱导 | 免疫组化或[[免疫细胞]]分析 |- | [[趋化作用]]或[[化学]]促进作用分析 | 流式细胞计数 |- | 细胞因子分泌活性的抑制 | 酶联免疫印迹(ELISPOT) |- | 免疫分析 | 反相[[溶血]]斑分析 |- | 放射免疫分析(RIA) | 细胞因子mRNA[[原位杂交]] |- | 免疫放射[[光谱分析]](IRMA) | |} 人细胞因子实验测定的标准化:人细胞因子的实验测定中仍存在诸多问题,选择分析方法不恰当则可能导致混乱甚至错误的结论。有时有必要同时选择几种方法分析某些细胞因子。生物分析方法特异性差,那些使用[[细胞株]]的生物分析可能与不同细胞因子反应,而且可受非细胞因子分子的影响。用于维持细胞生物的细胞因子能强烈地影响某些依赖细胞对一些细胞因子的反应程度。有的细胞在连续[[传代]]后可能失去对某些细胞因子的反应性,此外,由于[[抑制剂]]如受体[[拮抗剂]]、可溶性细胞因子受体或其他拮抗剂分子的存在,测得细胞因子活性结果可能会比实际活性偏低。 由于[[蛋白酶]]的存在或与抑制剂如可溶性受体形成[[复合物]],免疫分析能测得失去生物活性或具部分生物活性的细胞因子分子,并可受到[[基质]]效应的影响。此外,特异性问题影响了细胞因子mRNA测定,而mRNA水平亦不一定与具生物活性的细胞因子水平相一致。其它影响自动免疫分析方法准确性的问题还包括[[抗体]]的选择、分析的不均匀、分子[[糖基化]]的不同、[[寡聚体]]的形成及循环受体的影响,虽然免疫分析的结果并不一定反映细胞因子的生物活性,但一般而言,免疫分析及其它[[配体]]结合分析都更容易标准化。 目前,英国已能提供下列细胞因子的标准化参考[[试剂]]:IL-1α,IL-1β,IL-2-9,GM-SCF,M-CSF,TGF-α,TGF-β,TGF-γ,SCF,LIF([[白血病]][[抑制因子]]),IFN-α1,IFN-α2b,IFNγ,还能供应IFN-α2a,IFN-β及IFN-γ的国际标准。但于细胞因子分子的不均匀,其分析的标准化仍是问题。因此,要求各实验室的细胞因子分析应参考国际标准。某些细胞因子具有易被破坏的特性,从而要求非常细致和标准化的取样。 随着细胞因子在治疗上的不断应用,其测定方法亦得到了广泛的发展,临床检师必须选用正常的分析方法支持临床医生,为[[临床诊断]]提供相对简易的实验程序和准确的操作技术。 {{Hierarchy footer}} {{临床生物化学图书专题}}
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