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临床生物化学/乳酸脱氢酶(LD)及其同工酶
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{{Hierarchy header}} [[乳酸脱氢酶]]([[LD]])酶[[催化]]下列反应: {{图片|gopjmraq.jpg|乳酸脱氢酶(LD)酶催化反应:}} 不同方法测出LD结果差异较大,这是因为LD有5种不同的[[同工酶]],每种同工酶的最适反应条件不同。例如同为催化[[乳酸]]变为[[丙酮]]酸,LD<sub>1</sub>的最适pH为9.8,而LD<sub>5</sub>的最适pH为8.8。很难找出一个测定[[血清]]总LD的最适条件,检验医师在解释测定结果时应加以注意。 LD催化反应是无氧[[糖酵解]]的最终反应,广泛存在于人体各组织中,故测总酶临床意义不大,但LD是由两种不同[[亚基]](M,H)组成的四聚体,形成5种结构不同的同工酶,其中H型亚基中酸性[[氨基酸]]较多,电泳时负电荷多,因此电泳速率较快。按电泳向阳极泳动快慢,分别命名为LD<sub>1</sub>(H<sub>4</sub>),LD<sub>2</sub>(H<sub>3</sub>M),LD<sub>3</sub>(H<sub>2</sub>M<sub>2</sub>),LD<sub>4</sub>(HM<sub>3</sub>)和LD<sub>5</sub>(M<sub>4</sub>)。 【组织分布】 LD虽广泛存在于人体各组织中,但是不同组织中同工酶组成有差异,大致可分为三类:一类以LD<sub>1</sub>为主,[[心肌]]为此类代表,LD可占总[[酶活性]]50%以上,此外有[[红细胞]]等。另一类以LD<sub>5</sub>为主,以[[横纹肌]]为代表,此外有[[肝脏]]等。第三类以LD<sub>3</sub>为主,脾、肺为此类代表。LD主要存在于[[细胞质]]中,[[线粒体]]中未查到。 【[[生理]][[变异]]】 血清LD高低和性别关系不大,[[婴儿]]酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%-15%,血清LD同工酶目前常用[[电泳法测定]],由于具体方法差异,各学者报告的结果出入较大,但在成年人存在着如下规律:LD<sub>2</sub>>LD<sub>1</sub>>LD<sub>3</sub>>LD<sub>4</sub>>LD<sub>5</sub>,值得注意的是有学者报告,部分正常儿童血中LD<sub>1</sub>可大于LD<sub>2</sub>。 【[[标本]]的采集、处理和贮存】 由于[[血小板]]中也含大量LD,血清中和[[血浆]]所测LD有一定差异,一般都选用血清为测定标本,采血后应迅速分离血清,因红细胞中LD含量比血清高100倍以上,不宜用[[溶血]]血清为测定标本。 LD尤其是LD<sub>4</sub>和LD<sub>5</sub>与其它酶不同,不是[[热变性]]而是冷变性,在4℃贮存活性下降快于室温25℃,一般说25℃放2-3天LD活性变化不大,有条件者最好还是在采血后24小时内测定,标本应贮存于室温。 【参考值范围】 根据催化反应方向的不同,有两大类测LD方法,一大类为国际临床[[化学]]协会(IFFC)推荐方法,以丙酮酸为[[底物]],其参考值范围为80-500U/L(37℃);另一大类以乳酸为底物,在我国应用较普遍,其参考值范围为50-150U/L。 【临床应用】 LD及其同工酶是临床上常用酶之一,尤其是LD同工酶和[[CK]]-MB是临床常规实验室最常测的两种同工酶。临床常用于诊断和鉴别诊断心、肝和[[骨骼肌]]的[[疾病]]。表7-5是LD及其同工酶在这些疾病时的变化情况。 表7-5 总LD和LD同工酶在疾病的变化 {| class="wikitable" | | 疾病 | 总LD | LD同工酶 |- | | AMI | 常测酶中,升高最慢(8-10h),但升高时间最长(5-10d),峰值可达10倍正常上限 | LD<sub>1</sub>>LD<sub>2</sub>,并可持续到两周(部分病例总LD正常) |- | | 充血性[[心衰]],[[心肌炎]] | 可升高达5倍正常上限 | LD<sub>1</sub>>LD<sub>2</sub> |- | 增 | [[巨细胞性贫血]] | 可升高达5倍正常上限,治疗正确迅速下降 | LD<sub>1</sub>>LD<sub>2</sub> |- | | [[病毒性肝炎]] | 部分病例可升高达5倍正常上限 | LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub>(部分病例总LD正常 |- | | [[肝硬化]] | 常轻度升高 | LD<sub>5</sub>明显升高,LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub> |- | 高 | [[原发性肝癌]] | 部分病例升高 | LD<sub>5</sub>明显升高,LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub> |- | | [[梗阻性黄疸]] | 不定 | 常LD<sub>4</sub>>LD<sub>5</sub> |- | | [[肌肉]]损伤 | 视损伤程度不同而异 | 以LD<sub>5</sub>升高为主 |- | | [[肌萎缩]] | 可高达10倍正常上限 | 以LD<sub>5</sub>为主 |- | | 某些[[恶性肿瘤]]([[白血病]],[[结肠癌]]……) | 可升高,个别病例高达5倍正常上限 | 以LD<sub>3</sub>为主,LD<sub>3</sub>>LD<sub>1</sub> |- | 变异 | | | 某些病倒,电泳出现LD<sub>6</sub>,常显示预后不佳 |} 实用中此酶用于诊断AMI,特别是[[亚急性]]AMI。在AMI时,LD由于[[分子量]]较大(125000),在常用酶中升高最迟,但其半寿期较长,增高持续时间可达5-10天,此时其它酶活性已恢复正常,在亚急性AMI诊断上有一定价值。可惜的是,LD总酶诊断AMI的特异性较差,很多其它疾病,此酶都升高。LD同工酶则不同,诊断特异性可达95%以上,仅次于CK-MB,甚至有学者认为,只要测此二同工酶,不需作其它酶学检查就可诊断AMI。LD同工酶的高特异性是因为人体各组织器官中LD同工酶的分布情况并不相同,除心肌外,只有少数器官如红细胞中的LD是以LD<sub>1</sub>为主,绝大多数的AMI患者血中的LD同工酶都可出现LD<sub>1</sub>>LD<sub>2</sub>变化,即所谓的“反转”(flip)类型变化,其持续时间甚至可超过总LD升高时间,达两周之久。临床上可见部分患者在恢复期,所有酶活性都降至正常,但仍有“反转”类型的LD同工酶变化,这些患者常有复发倾向,除AMI和心肌损伤,此种“反转”类型变化还见于[[溶血性贫血]]和巨细胞性贫血,但此类疾病在临床上不难与AMI相区分。 60年代临床上曾经用过所谓“α-[[羟丁酸脱氢酶]]”的测定来诊断AMI。实际上并不存在这种酶,所测的主要是LD<sub>1</sub>的活性,目前国外已较少测定此酶而改用更精确的测LD同工酶的方法。 其次,LD及其同工酶常用于肝脏疾病的诊断和鉴别诊断,由于[[肝细胞]]中主要为LD<sub>1</sub>,在肝实质病变时常出现LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub>,但由于正常血清中LD<sub>5</sub>含量很少,不少病例就是出现同工酶异常LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub>时,总LD活性仍为正常,故LD同工酶检查阳性率远高于总LD,一般在胆道疾患或梗性[[黄疸]]早期未累及肝实质时,不出现LD<sub>5</sub>>LD<sub>4</sub>,仍为LD<sub>4</sub>>LD<sub>5</sub>。值得注意的是,在骨骼肌疾病和损伤时,也会出现类似变化,临床上诊断各型肌萎缩也常测定LD及LD同工酶,早期常为LD<sub>5</sub>升高,但在晚期LD<sub>1</sub>和LD<sub>2</sub>也升高。 恶性肿瘤可由于[[肿瘤细胞]]恶性增长和[[坏死]]而引起血清LD升高,如转移到肝脏往往伴有LD<sub>4</sub>和LD<sub>5</sub>升高,此外一部分[[肿瘤]],如白血病等常有LD<sub>3</sub>和LD<sub>4</sub>的增高。 {{Hierarchy footer}} {{临床生物化学图书专题}}
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