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寄生虫学/寄生虫人工培养
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{{Hierarchy header}} 本书仅介绍三种[[原虫]]的人工培养。 一、溶组织内阿米巴培养。 1.营养琼脂双相[[培养基]] ⑴固体部分:[[牛肉]]浸膏3g;[[蛋白胨]]5g;[[琼脂]] 15g;液体1000ml(见“液体部分”)。 ⑵液体部分:[[氯化钠]]8g;[[氯化钾]]0.2g;[[氯化钙]]0.2g;[[氯化镁]]0.01g;[[磷酸氢二钠]]2g;[[磷酸二氢钾]]0.3g;[[蒸馏水]]1000ml。 制备先[[配液]]体部分2000ml,氯化钙与氯化镁另装小瓶,[[高压灭菌]](压力6.81公斤20分钟)后冷却,合并一起,取1000ml配固体部分,经沸水浴2~3小时,使完全溶解。若有残渣可用4层[[纱布]]过滤除去,趁热将滤液分装[[试管]],每管5ml,高压灭菌,形成斜面,冷却后放冰箱中备用。[[接种]]前,每管加液体部分4.5ml和[[牛血清]]0.5ml,并加米粉20mg(用大米粉分装小管,经180℃烤箱[[消毒]]3次)。 2.[[洛克氏液]]鸡蛋[[血清]]培养基 ⑴培基成分:洛克氏液70ml;[[灭活]]血清(每管加0.5ml);米粉(每管加20mg);鸡蛋4个。 ⑵洛克氏(Locke)液:氯化钠9g;氯化钙0.2g;氯化钾0.4g;[[碳酸氢钠]]0.2g;[[葡萄糖]](压力3.63公斤15分钟)2.5g;蒸馏水1000ml。 制备先配洛克氏液1000ml,取鸡蛋用肥皂水洗刷净,以70%[[酒精]]洗净后,破壳将蛋黄、蛋清倾入含70ml洛克氏液的小三角烧瓶内,加有玻璃珠,充分摇动使其内含物混合,之后分装消毒试管内,每管约5ml,置斜位在70℃下经1小时凝固斜面,翌日再置[[高压]]消毒20分钟。接种前每管加洛克氏液4.5ml、[[马血清]]0.5ml、米粉20mg。 二、[[阴道]]毛滴虫培养 常用肝-胨-糖培养基的培养方法。 1.培养基的配制:15%肝浸液100ml;蛋白胨2g;葡萄糖0.5g。 将以上成分混合,加热使溶,经滤纸过滤,调节pH至5.5~6.0。每管分装5ml,8磅20分钟高压灭菌,冷却后,置37℃[[恒温]]箱中24小时,证明[[无菌]]后,贮存于冰箱备用。接种前每管加灭能无菌马血清1ml,即可用。 15%肝浸液的制备:取牛或[[兔肝]]15g,洗净,剪碎如小米粒大小,浸入100ml,蒸馏水中,置冰箱过夜,次日煮沸半小时,用4层纱布过滤除去渣滓,补充蒸馏水至100ml,即成15%肝浸液。 2.培养方法①以无菌棉拭从阴道后穹窿处取分泌物,无菌接种入上述的培养基中;②初次接种和第1、2次转种时,应加[[青霉素]]5~10万单位/2ml培基;③培养温度为35~38℃为宜;④pH在5.4~6.8之间。 {{Hierarchy footer}} {{人体寄生虫学图书专题}}
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