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医学微生物学/白喉杆菌
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{{Hierarchy header}} [[白喉]][[杆菌]](Corynebacterium diphtheriae)是引起小儿白喉的[[病原菌]],属于[[棒状杆菌属]](Corynebacterium)。[[棒状杆菌]]种类较多,包括白喉杆菌和[[类白喉杆菌]]。类白喉杆菌为非[[致病菌]],常见的有假白喉杆菌,[[结膜干燥]]杆菌、[[溃疡]]杆菌和[[痤疮]]杆菌等。本章介绍白喉杆菌。 '''一、[[生物学性状]]''' (一)形态[[染色]] 白喉杆菌细长稍弯,排列不规则,常呈L、V、X、T等字形或排成栅栏状。[[革兰氏染色阳性]];用[[美兰]]液染色菌体着色不均匀,常呈着色深的颗粒;用[[奈瑟氏]]染色菌体染成黄褐色,一端或二端染成兰色或深兰色颗粒,称为异染颗粒(Metachromatic granules),是本菌形态特征之一。 (二)培养特性 白喉杆菌为[[需氧菌]]或[[兼性厌氧菌]],最适温度为37℃,最适PH为7.2~7.8,在含[[血液]]、[[血清]]或鸡蛋的[[培养基]]上生长良好。[[菌落]]呈灰白色、光滑、圆形凸起,在含有0.033%亚碲酸钾血清培养基上生长繁殖能吸收碲盐,并还原为金属碲,使菌落呈黑色,为本属其他棒状杆菌共同特点。且亚碲酸钾能抑制[[标本]]中其他[[细菌]]的生长,故亚碲酸钾血[[琼脂]]平板可作为棒状选择培养基。根据在此培养基上白喉杆菌落的特点及[[生化反应]],可将白喉杆菌区分为重型(Gravis)、中间型(Intermedus)和轻型(Mitis)三型,三型白喉杆菌的分布有所不同,常随地区和年份有别,有流行病学意义。 (三)[[抵抗力]] 对[[湿热]]的抵抗力不强,对一般[[消毒剂]]敏感。60℃经10分钟或煮沸迅速被杀死,1%[[石炭酸]]中经1分钟死亡,但对干燥、寒冷和日光的抵抗力较其他无[[芽胞]]的细菌为强,在日常物品、食品及衣服上能生存多日,本菌对[[青霉素]]和常用[[抗生素]]比较敏感。 '''二、[[致病性]]和[[免疫性]]''' (一)致病性 本菌的致病物质主要是[[白喉毒素]]。白喉毒素是含有两个[[二硫键]]的[[多肽]]链,[[分子量]]为62,000。经[[蛋白酶]]水解后,可分为A和B两个片段,中间仍由二硫键联接。B片段,无[[酶活性]],但能与[[宿主]]易感[[细胞表面]]特异性[[受体]]结合,并通过[[易位]]作用使A片段进入[[细胞]]。A片段具有酶活性,能将氧化型[[烟酰胺]][[腺嘌呤]]二核苷(NAD+)水解为烟酰胺及腺嘌呤[[二磷酸]][[核糖]](ADPR)两部分,并[[催化]][[延伸因子]]-2(Elongation factor-2,EF-2)与ADPR共价结合,使EF-2失去转位活性,从而中止肽-tRNA及mRNA在[[核糖体]]上由[[受位]]转移至供位,肽链不能延长,细胞[[蛋白质合成]]受阻,[[细胞死亡]],病变产生。 仅携带β-棒状杆菌[[噬菌体]]的[[溶源性]]白喉杆菌才能产生[[外毒素]],因为白喉毒素就是β棒状杆菌噬体毒素[[基因]](tox+)编码的[[蛋白质]]。tox+基因的表达与菌体无机铁含量密切相关,铁含量适量时, tox+[[基因表达]],否则不表达。 白喉杆菌尚产生一些侵袭性物质,如类似于[[结核杆菌]]的[[索状因子]](Cord factor),能破坏细胞的[[线粒体]]膜,导致[[呼吸]]和[[氧化磷酸化]]作用受到抑制。 白喉的[[传染源]]是白喉病人及恢复期[[带菌者]]。本菌存在于[[假膜]]及[[鼻咽]]腔或鼻分泌物内,经飞沫、污染物品或饮食而传播。白喉杆菌侵入[[易感者]][[上呼吸道]],通常在咽部粘膜生长繁殖,并分泌外毒素及侵袭性物质,引起局部[[炎症]]和全身[[中毒症状]]。局部粘膜[[上皮细胞]]发生[[坏死]],[[血管扩张]],[[粒细胞]][[浸润]]及[[纤维]][[渗出]],因此形成灰白色膜状物,称为假膜(Pseudomembrane),若病损进一步扩展至喉部或[[气管]]内,可引起[[呼吸道]]阻塞,甚至[[窒息]]。尽管细菌一般不侵入血流,但外毒素可被吸收入血,迅速与易感组织细胞结合,使[[心肌]]、肝、肾和[[肾上腺]]等发生退行性病变,并可侵犯腭肌和咽肌的[[周围神经]]细胞,临床上出现[[心肌炎]]和[[软腭麻痹]]、[[声嘶]]、肾上腺[[机能障碍]],[[血压]]下降等[[症状]]。本菌偶有侵害[[眼结膜]]、[[外耳道]]、[[阴道]]和[[皮肤]][[伤口]]等处,也可形成假膜。 (二)免疫性 白喉病后有较强的免疫力,主要是机体能产生中和白喉外毒素的[[抗体]](lgG)。1~5岁[[易感性]]最高,5岁以上易感性逐渐下降,成人绝大多数由于[[隐性感染]]或[[预防接种]],已获得免疫力。 [[锡克氏试验]](Schick's test)用于测定人体对白喉有无免疫力,确定是否需要预防接种。方法是在左[[前臂]]屈侧[[皮内注射]]0.1ml白喉毒素(含1/50的豚鼠[[最小致死量]]),同样在右前臂屈侧皮内注射对照[[毒素]](加热80℃经5分钟破坏其[[毒性]])0.1ml,作为对照。阴性反应,两侧注射处都没有出现红晕或浸润,表露机体对白喉有免疫力。阳性反应,左侧注射处24~36小时后,出现圆形微隆起红晕,逐渐形成[[红肿]]硬块,至第四天达最高峰,直径达1~2cm,7~14日后反应逐渐消退,而对照侧没有反应,表示对白喉没有免疫力。[[假阳性]]反应,表示既有免疫力,又有[[变态反应]]。混合反应,表示机体对白喉毒素没有抗毒免疫力,但对毒素[[蛋白]]则有变态反应,应注意区别。 '''三、[[微生物学]]诊断''' 临床上疑似白喉的病人不必等待检验结果,应立即给予[[抗毒素]]和抗生素治疗。但对于白喉流行期的首例病人应做微生物学检验予以证实。 (一)直接染色[[镜检]] 用棉拭采取假膜边缘部渗出物,[[涂片]],用奈瑟氏染色或美兰染色,镜检有无含异染颗粒的棒状杆菌。结合临床症状,可作出初步诊断。确诊必须通过[[细菌培养]]并进行[[毒力]]试验。 (二)凝固血清棉拭培养法 将沾有马或[[牛血清]]的棉拭子放在[[无菌]][[试管]]内,经8~10磅[[蒸气灭菌]]20~30分钟,并使血清凝固,且此凝固血清棉拭采取病人咽部标本,置37℃培养8~10小时后,直接涂片镜检。此法可作为大量检查时快速培养诊断之用。 (三)培养检查 将棉试检材[[接种]]于鸡蛋斜面或Loeffer's血清凝固[[斜面培养]]基及亚碲酸钾平板培养基上,置37℃培养,待斜面或平板上长出典型的灰色疑菌落,挑取转种到鸡蛋呀或血清斜面进行分离培养,以供进一步形态染色或毒力试验鉴定。 (四)毒力试验 1.豚鼠试验 取体重250g 豚鼠2只,其中一只试验前12小时,由腹腔注射[[白喉抗毒素]]250~500单位,供做对照。然后对照。然后各于[[皮下注射]]48小时的[[培养液]]2ml,若于2~4天注射抗毒素的豚鼠死亡,而对照豚鼠存活,便证明所试验[[菌株]]为有毒白喉杆菌。 2.E平板试验将浸有白喉抗毒素的无菌滤纸条贴在含20%[[马血清]]的琼脂平板上,然后沿滤纸条垂直方向划线接种待测细菌,同时也接种已知产毒株和不产毒株做为对照。37℃培养48小时后,若待检菌株产生白喉外毒素,则在滤纸条和划线生长的菌苔交界外出现白色沉淀线。 四、特异防治 预防接种效果良好,可显著降低[[发病率]]和[[病死率]]。6个月以上至3见儿童应预防接种[[白喉类毒素]]、[[破伤风类毒素]]和[[百日咳菌苗]]三联制剂或[[明矾]]淀白喉类毒素。8岁以上锡克氏试验阳性者也需接种。对密切接触过白喉病人的易感儿童,可[[肌内注射]]1000~2000单位白喉抗毒素作紧急预防,同时注射白喉类毒素以便延长免疫力。 白喉抗毒素做为特效治疗制剂,应在发病早期注射足量的白喉抗毒素,一般用量为2万~10万单位,作[[肌肉注射]],重者可作[[静脉滴注]]。使用抗毒素血清之前进行皮肤试验,防止发生异种血清[[过敏反应]]。使用抗毒素的同时,应给予[[抗菌治疗]],如用[[普鲁卡因青霉素]][[肌注]],直至症状消失和白喉杆菌培养阴性为止。 ==参看== *[[白喉杆菌]] {{Hierarchy footer}} {{医学微生物学图书专题}} {{导航板-喉和喉部疾病}} [[分类:喉]]
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