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[[二氨基联苯胺]](Diaminobenzidine,DAB)是[[辣根]]过氧化物酶最敏感、最常用的显色[[底物]],反应产物因不溶于水、[[二甲苯]]和醇的棕色沉淀物而被广泛地用于[[蛋白]]印迹(Western Blot,WB)、[[免疫]]组织化学(Immunohistochemistry,IHC)和[[免疫细胞化学]](Immunocytochemistry,ICC)、斑点印迹(Dot blot)和生物芯片(Biochip)等的[[染色]]和显色反应。 保存条件 [[试剂盒]]应在-20℃,避光、密封保存。 使用说明 使用前先用[[蒸馏水]]将B显色液(1:25)稀释为工作液,然后按比例(1:25)加入A显色液,混匀后立即使用。显色时间1-30分钟,显色时间过长可引起[[本底]]增高,故应密切观察显色过程(一般3-10分钟最理想),并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。 稀释方法:取去离子水920ul,加入B显色液40ul混匀,再加入40ul的A显色液,混匀后即可使用。工作液建议用量:免疫组化50-100ul/切片,WB每张膜200-5000ul/膜 注意事项 1. DAB溶液应[[低温]]密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用; 2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用; 3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验[[环境污染]]; 4. DAB有潜在[[致突变作用]],操作时应注意穿戴好防护用具。
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二氨基联苯胺
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