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抗核抗体
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[[抗核抗体]](antinuclear antibody,ANA)又称[[抗核]]酸[[抗原抗体]],是一组将自身[[真核细胞]]的各种成分[脱氧核糖[[核蛋白]](DNP)、DNA、可提取的[[核抗原]](ENA)和RNA等]作为靶[[抗原]]的[[自身抗体]]的总称,能与所有动物的[[细胞核]]发生反应,主要存在于[[血清]]中,也可存在于[[胸水]]、[[关节]][[滑膜]]液和尿液中。 ==原理简介== 抗核抗体在多种[[自身免疫病]]中均呈不同程度的阳性率,如[[系统性红斑狼疮]](SLE,95%~100%)、[[类风湿性关节炎]](RA,10%~20%)、[[混合性结缔组织病]](MCTD,80%~100%)、[[干燥综合症]](SjS,10%~40%)、[[全身性硬皮病]](85%~90%)、狼疮性[[肝炎]](95%~100%)、[[原发性胆汁性肝硬化]](95%~100%)等,但经皮质激素治疗后,阳性率可降低。抗核抗体在[[类风湿]]病人中约有20%~50%IgG型ANA呈阳性,小儿类风湿ANA的阳性率约19%~35%,伴发[[虹膜睫状体炎]]者阳性率高(505~90%),故ANA阳性预示类风湿有发生慢性[[睫状体]]炎的可能。已发现75%类风湿病人有多形核[[白细胞]]的特异性ANA或[[抗中性粒细胞胞浆抗体]](ANCA)可使白细胞核受到破坏。 ==详细内容== 抗核抗体是一组对细胞核内的DNA,RNA,[[蛋白]]或这些物质的[[分子]][[复合物]]的自身抗体。按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来,如(一)抗DNA[[抗体]],(二)抗[[组蛋白]]抗体,(三)抗非组蛋白抗体,(四)抗核仁抗体等。每一大类又因不同抗原特性而再分为许多种类。因此ANA在广义上是一组各有不同临床意义的自身抗体,更确切的名称应为抗核抗体谱。ANA 主要存在于IgG,也见于IgM 、IgA,甚至LgD及LgE中。 常见的核[[免疫荧光]]杭[[核抗]]体试验有以下几种图形:(1)均质型:[[核质]][[染色]]均匀一致,这种染色型常与抗组蛋白和抗DNA抗体有关;(2)斑点型:核质染色呈斑点状,抗可提取性核抗原(ENA)抗体常呈这种染色型;(3)周边型:荧光染色围绕在[[核膜]]周围,它与抗DNA抗体有关;(4)[[核仁]]型:仅有核仁染色,具有抗4-6sRNA抗体呈现这种染色型;(5)[[着丝点]]型:在体外培养的[[细胞株]]([[喉癌]][[细胞]])在[[核分裂]]相期时,可见到荧光染色的着丝点排列成特殊图型,而在[[鼠肝]]做[[底物]]中看不到此类图型,而被遗漏。 ==标本采集== 采血3ml,不抗凝。 ==正常值范围== 滴度<1:10(间接荧光法)。 ==临床意义== 阳性:主要SLE患者,它的滴度可达1:320占86%,如果经激素治疗后缓解或危重时,大量抗核抗体形成免疫复合物时,ANA反为阴性,其他自身免疫性疾病,ANA也可出现阳性,但滴度低于1:80。 ==抗核抗体分类== 抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 ===抗DNA抗体=== 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗[[单链]](ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随[[疾病]]的活动度而升降,病情好转者其[[滴度]]多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非[[自身免疫性疾病]],如[[细菌]]和[[病毒感染]]。故在临床上无实用价值。而抗ds DNA抗体被认为是[[红斑狼疮]](SLE)所特有。 测定本抗体的方法有间接免疫荧光法(IFA),放射免疫法(Farr法),ELISA,[[血凝]]法等。我国的临床工作者多采用前两种方法,尤其是IFA法。它是以短膜虫或马[[锥虫]]为底物,利用其体内含有的纯双链DNA,进行免疫荧光测定。 血清稀释度达1:5或更高者称为阳性。以Farr法测抗DNA抗体,结合率>20%者为阳性。据[[北京协和医院]]资料显示,SLE阳性率为62%,活动期67.7%,缓解期29.1%,非SLE者阳性率虽达20%,但其结合率多在30%以下。有7%的正常人呈假性反应。结合率高于30%者几乎都是活动期SLE。 抗DNA的自身抗体在SLE发病中起一定作用。在一些SLE患者,DNA大分子存在于循环中或[[粘附]]于多种器官的[[微血管]]结构,这些循环或器官原位抗原型DNA均可与循环自身抗体发生反应,形成[[免疫复合物]],激活[[炎症]]系统,在一些器官如[[肾脏]],肺和脑组织引起免疫复合物介导的疾病,导致组织损伤。 ===抗可提取的核抗原=== (extractable nuclear antigen.ENA)抗体,此抗体原经盐水或[[磷酸]][[缓冲液]]处理,易从[[胞核]]中提取出来,且不含DNA。应用免疫荧光技术,抗ENA抗体型染色多呈斑点型。此类抗原分为九种,故产生九种相应抗体。 (1)抗核糖核蛋白抗体(antiribonucleoprotein;抗RNP抗体):抗原来源与SM相同。它对[[去氧]][[核糖核酸酶]]不敏感,但对核糖核酸酶,[[胰酶]]敏感。1972年把它作为诊断混合性结缔组织病(MCTD)的重要[[血清学]]依据。但以后发现本抗体可在多种[[风湿]]性疾病出现,不具备对某个病的特异性,但有助于鉴别[[结缔组织病]]和非结缔组织病。抗核RNP抗体见于近32%的SLE患者,几乎见于所有MCTD患者。 (2)抗SM抗体:SM系一患者Smith的简称。1966年Tan&Kunkel首先在患者Smith体中发现。抗原来源于小牛,兔[[胸腺]],人脾等组织的一种[[酸性糖蛋白]]。抗SM抗体可见于1/3或以上的SLE患者,不出现于其他疾病中,对SLE诊断有特异性,成为很有价值的SLE诊断标志,但无此抗体不能排除诊断。 (3)抗SS-A抗体:系在发现Sjogren氏[[综合征]](SS)的"A"抗原后而命名,主要见于SS。本抗原可以从人、牛、[[猪脾]]中提取。它除存在核内外,也存在于[[细胞浆]]内。对胰酶敏感,对核糖核酸酶抵抗,能耐热(56度)。 (4)抗Ha抗体:抗Ha抗体可与小牛胸腺可溶性核提取物(以及小牛和鼠的[[肝提取物]])起反应。见于SS患者,亦称之为SS-B抗体.应用[[沉淀素]]反应,[[补体结合]]以及荧光技术检测。目前多数人认为13%SLE及33%SS患者有抗Ha[[沉淀性抗体]]。 (5)抗PM-1抗体:系[[多发性肌炎]]的[[特异性抗体]]。抗原系小牛胸腺核提取物,有人暂称之为PM-1。最初有人应用[[补体结合抑制试验]],确定该抗体特性,在[[皮肌]]类患者中发现PM-1抗体。有人测定在多发性肌类患者阳性率13.6%,皮肌类(DM)20%,系统性硬化并[[肌炎]]25%,SLE并肌炎偶有阳性,在其他疾病和正常人均阴性。说明本抗体对肌炎诊断有一定特异性。 (6)抗MA1抗体:为近年发现抗核酸蛋白抗原的抗体,称之为抗MA1抗体。该抗体只出现于某些严重的SLE患者中。 (7)抗Scl-70抗体:因出现在[[硬皮病]]且其分子量为70000,故名。抗原为碱性非组蛋白,北京协和医院对系统性硬化用[[免疫]]双扩散法测定得抗Scl-70抗体阳性率为60%。在其他[[结缔组织]]和非结缔组织病偶有阳性,而正常人均阴性,说明本抗体有较高的特异性,是系统性硬化的标记抗体。 (8)抗Jo-1抗体:因患者而命名。国外报道在多发性肌炎(PM)患者阳性率为30-50%,合并有[[肺间质纤维化]]的肌炎则达60%,而在[[皮肌炎]](DM)患者则低于10%,在其他疾病均阴性。 (9)抗Ku抗体:因患者命名,国外报道本抗体多见于合并有肌炎的系统性硬化患者,阳性率达55%。 总之,抗PM-1,抗Jo-1,抗Ku都与肌炎有关。 ===抗组蛋白抗体=== 组蛋白是一组[[碱性蛋白质]],含有稍高量的[[赖氨酸]]及[[精氨酸]]。是与DNA形成的复合物,结合成DNA一组蛋白。组蛋白抗体见于药物诱发的SLE。国外报道,用免疫荧光三步法测23例药物致[[狼疮]]阳性率为96%,12例SLE中42%阳性。北京协和医院以同样方法检测488例服用[[异烟肼]],68例服用[[苯妥英钠]],40例服用[[复降片]](内含肼苯哒嗪),都在服用6个月以上者和另133例服[[他巴唑]]3个月以上者,无一例查到本抗体。这种差异可能与近年来我国服用肼苯哒嗪和[[普鲁卡因酰胺]]的患者较少之故,也不能除外人种不同而造成的差异。 ===[[抗着丝点抗体]]=== 其抗原为紧附于[[染色体]]着丝点的DNA[[蛋白质]]。因此需要选择分裂相活跃的细胞作为底物,这种细胞的着丝点较易被暴露。多选用人喉癌[[上皮细胞]](HEP-2),其优点是核大,分裂相多。国外报道本抗体多见于CREST综合征(即表现为软组织[[钙化]],雷诺现象,[[食管]]功能低下,指端硬化,[[毛细血管扩张]])。阳性率达90%以上,称之为CREST的标记抗体。根据[[协和医院]]观察测定结果,我国系统性硬化绝大部分是弥散型,CREST型极少见;抗着丝点抗体的阳性率在系统性硬化为20%,CREST型38%,弥散型10%,说明它不一定是CREST型的标记抗体。 ===抗核仁抗体=== 抗核仁抗体是一组对核仁不同RNA成分的抗体。由于成分(4-6sRNA)不同,因此构成斑块,斑点,均质等不同图型。本[[核体]]在以HEP-2细胞为底物间接免疫荧光检查为明显。协和医院免疫组的阳性率是PSS38.5%,SLE6.1%,RA15.3%,(阳性者都合并有指端硬化),SS8.6%,PM/DM10.0%,雷诺现象25%,其他结缔组织病和正常人均阴性。抗核仁抗体不仅在PSS最多见,且滴度亦高,故它对PSS诊断有一定的帮助。 抗核抗体的检测在自身免疫病的[[临床诊断]]、鉴别诊断、评价疗效和预后估计中具有较大的意义,因此常将抗核抗体的检测作为自身免疫病的重要初筛试验。 [[分类:免疫医学]] {{怎样看化验单专题}}
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