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基础检验学/人绒毛膜促性腺激素检查
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{{Hierarchy header}} 成熟女性因受精的[[卵子]]移动到[[子宫腔]]内着床后,形成[[胚胎]],在发育成长为[[胎儿]]过程中,[[胎盘]][[合体滋养层]][[细胞]]产生大量的[[人绒毛膜促性腺激素]](human chorionic gonadotropin,[[HCG]]),可通过孕妇[[血液循环]]而[[排泄]]到尿中。当[[妊娠]]1-2.5时,[[血清]]和尿中的HCG水平即可迅速升高,第8郛周达到高峰,至郛期第4个月始降至中等水平,并一直维持到妊娠末期。(图9-1) {{图片|goo5gnjo.jpg|正常妊娠妇女血清中HCG平均值}} 图9-1 正常妊娠妇女血清中HCG平均值 HCG是由两个非[[共价键]]相连的肽链组成的[[糖蛋白]][[激素]]。其单个[[亚基]]不具有生物活性,当连接成完整[[化合物]]时始具活性,[[分子量]]约为4.7万。其主要功能就是刺激[[黄体]],有利于[[雌激素]]和[[黄体酮]]持续分泌,以促进了宫[[蜕膜]]的形成,使胎盘生长成熟。HCGα[[亚单位]]的[[氨基酸]]排列与黄体[[生长激素]]([[LH]])α亚单位相似,故用完整的抗HCG[[分子]]的[[抗体]]测定HCG时与LH间有[[免疫]][[交叉反应]]。但它们的β亚单位各不相同。因此为避免交叉反应,目前均采用高将近的抗β-HCG[[单克隆抗体]]进持特异的HCG检查,近年来还有报道采用抗β-HCG羧基末端肽单克隆抗体以进一步提高检测的敏感性和特异性。 '''(一)胶乳[[凝集抑制试验]]和[[血凝抑制试验]]''' 1960年Wide及Gemzell开始采用胶乳凝集抑制试验(latex agglutinationinhibitiontest,LAIT)技术测定尿中HCG,即将尿液与抗 HCG血清作用后,加入已吸附[[抗原]]的胶乳,如尿中含HCG较多,则先与抗 HCG结合,不再有多余的抗 HCG与胶乳产生[[凝集]]而仍呈均匀的乳胶状,是为阳性。相反,不含HCG尿不与[[抗血清]]作用,当加入吸附抗原的胶乳后,抗血清可与胶乳[[抗原反应]],出现明显的“特”特性凝集颗粒,即为阴性。也可利用[[血细胞]]的血凝抑制试验(hemoagglutinationinhibition test,HAIT),其原理与胶乳法一致只是载体由胶乳改成羊[[红细胞]]。这两种试验方便简便,灵敏度为100-500Mu/ML,适合大批[[标本]]检查,但因特异性差,不能定量,已逐渐被单克隆抗体法所取代。 '''(二)放射免疫试验(RIA)''' 利用放射标记的HCG与被检测尿中的HCG竞争性地结合抗-HCG抗体,当被检尿中HCG增加时,[[结合物]]的[[放射性]]减低,与不同含量标准品对比可测尿中HCG的含量。使定量检测成为可能。 由于RIA需一定设备,试验手续繁甭,且有[[核素]]污染问题,不适用于临床常规应用。 '''(三)[[酶联免疫吸附试验]](ELISA)''' 该方法目前已广泛应用于临床,其基本原理是运用夹心免疫酶分析技术。即采用HCG单克隆抗体包被于固相表面,样品中的HCG都将与支持物表面的抗体相结合。与样品一孵育后,冲洗耳恭听表面,然后加入特异性酶标抗β-HCG亚基的单克隆抗体,最后加入酶作用的[[基质]],即产生颜色。该法可目测,灵感度为20-50Mu/ml,采用抗β-HCG单克隆抗体二点酶免疫法进行定量,灵敏度可达2-10mU/ml。目前免疫酶法进一步发展为更简便、适于病人自检的一步法,即免疫酶渗透试验。 '''(四)单克隆抗体[[胶体]]金试验''' 免疫胶体金法是将羊抗人HCG抗血清(多抗)、羊鼠IGG分别固定特制的纤维素试带上并呈两条线上下排列,羊抗鼠IGG线在试带知上方为阴性对照,羊抗人HCG多抗在下方为测定。试带条中含均匀分布的胶体金标记鼠抗人β-HCG单克隆抗体和无关的金标记鼠IGG。检测时将试带浸入被检尿液中(液面低于固定的两条抗体线)后迅速取出。尿液沿试带上行,尿中的β-HCG在上行过程中与胶体金标记单克隆抗体结合,待行至羊抗人HCG抗体线时,形成金标记的β-HCG单元抗尿HCG羊抗人HCG[[复合物]]而在试带上呈兹红色区带,为HCG阳性反应,试带上无关的金标记鼠IGG随尿液继续上行至羊抗鼠IGG处时与之形成紫红色的金标记的抗原体复合物是为阴性对照。判断结果时,含HCG的尿液试带可显示上、下两条紫红色线条,而阴性标本则只显出上边一条紫红色线。 [方法学评价] 纵观HCG检查方法,有生物激动、[[化学]]法、免疫法等。几种不同的HCG检查方法比较见表9-1。免疫法的检测手段不断更新、向特异简便、快速、普及方向发展,现已有胶乳或[[血凝]]抑制[[试剂]]、放射免疫、酶免疫、胶体金纸片法等。除诊断早期妊娠早孕钉,HCG检查对[[病理]]妊娠职[[宫外孕]]及胎盘[[滋养层]][[疾病]]的诊断、鉴别、治疗及追踪观察等均有意义。 表9-1 几种检查HCG方法的比较 {| class="wikitable" | 妊娠试验名称 | 灵敏度(mU/ml或IU/L) | 实验条件 | 应用价值 |- | 雄[[蟾蜍]]([[青蛙]])试验(MT) | 3000 | 需合格动物、简便需4-12小时 | 不能定量已淘汰 |- | 胶乳凝集抑制试验(LAIT) | 100-500 | 试剂易得、简便,5min完成 | 一般早孕,敏感性低不能定量,少用 |- | [[红细胞凝集]]抑制试验(HAIT) | 100-500 | 试剂条件要求高2小时完成 | 敏感性低,少用半定量 |- | 放射免疫试验(RIA) | &lt;2 | 要求一定设备,条件要求高2小时完成 | 试剂可定量,最灵敏,但很少应用 |- | 酶联免疫吸附试验(ELISA)过筛法 | | 多种形式,小珠、板、薄片包被,5-15min完成 | 半定量,灵敏度好广泛应用 |- | 夹心酶免疫试验 | 20-50 | 试剂,免疫应用板1-3小时可完成 | 可定量,灵敏度高常应用 |- | 免疫胶体金法 | 10-25 | 1-15min完成 | 半定量,灵敏度好广泛应用 |} [参考值] 妊娠不同时期以及各孕妇之间血清HCG绝对值变化大,一般非孕妇女血HCG&lt;100IU/L,[[妊娠期]]间血清HCg 水平见表9-2。 在妊娠最初3个月,HCG水平每(2.2±0.5)天约升高一倍,尿HCG(HCG半定量法)非孕妇女&lt;25IU/L,孕40天&gt;5000IU/L,孕60-70天&gt;(8-32)×10<sup>4</sup>IU/L(清晨尿HCG水平最高,接近血清水平)。 表9-2 妊娠期间血清HCG水平 {| class="wikitable" | 妊娠周数 | HCG(IU/L) |- | 0.2-1 | 5-50 |- | 1-2 | 50-500 |- | 2-3 | 100-5000 |- | 3-4 | 500-10000 |- | 4-5 | 1000-50000 |- | 5-6 | 10000-100000 |- | 6-8 | 15000-200000 |- | 2-3月 | 10000-100000 |} [临床意义] HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义,对与妊娠相关疾病、[[滋养细胞]][[肿瘤]]等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。 1.诊断早期妊娠:孕后35-50天HCG可升至大于2500IU/L。60-70天可达8万万IU/L,[[多胎妊娠]]者尿HCG常于一胎妊娠。 2.异常妊娠与胎盘功能的判断:①[[异位妊娠]]:如宫外孕时,本试验只有60%的阳性率,在子燥[[出血]]3天后,HCG仍可为阳性,故HCG检查可作为与其它腹症的鉴别。HCG常为312-625IU/L。②[[流产]]诊断与治疗:[[不完全流产]]如子宫内尚有胎盘组织残存,HCG检查仍可呈阳性;完全流主或[[死胎]]时HCG由阳性转阴性,因此可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。③先流产:如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产。如HCG在2500IU/L以下,并逐渐下降,则有流产的或死胎的可能,当降至600IU/L则难免流产。在保胎治疗中,如HCG仍继续下降说明保胎无将近,如HCG不断上升,说明保胎成功。④在产后4天或[[人工流产术]]后13天,血清HCG应低于1000IU/L,产后9天或人工流产术后25天,,血清HCG应恢复正常。如不符合这一情况,则应考虑有异常可能。 3.滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测①[[葡萄胎]]、[[恶性葡萄胎]]、[[绒毛膜上皮癌]]及睾刃[[畸胎瘤]]等患者尿中HCG显著升高,右可达10万到数百万IU/L,可用稀释试验诊断如妊娠12周以前1:500稀释尿液呈阳性,妊娠12周以后1:250稀释尿液呈阳性,对葡萄胎诊断有价值。1:100-1:500稀释尿液呈阳性对[[绒毛膜癌]]也有诊断价值,如男性尿中HCG升高,要考虑睾刃肿瘤如[[精原细胞]]癌、[[畸形]]及异位HCG瘤等。②[[滋养层细胞]]肿瘤患者术后3周后尿HCG应&lt;50IU/L,8-12周呈阴性;如HCG不下降或不转阴,提示可能有残留病变,这类闰例常易复发,故需定期检查。 4.其它[[更年期]]、[[排卵]]及双侧[[卵巢切除术]]均可致[[黄体生成素]]升高,因LH与HCG的α肽链组成相同而使采用抗HCG抗体的妊娠试验阳性,此时可用β-HCG的单克隆二点[[酶免疫测定]]鉴别。[[内分泌]]疾病中如[[脑垂体]]疾病、[[甲状腺功能亢进]]、[[妇科疾病]]如[[卵巢囊肿]]、[[子宫癌]]等HCG也可增高。近年来发现[[恶性肿瘤]]如默契胎瘤、[[胰腺癌]]、[[胃癌]]、[[肝癌]]、[[乳腺癌]]、[[肺癌]]等血中HCG也可升高,因此将HCG看作是癌标志物之一。但必需结合临床情况及其它检查结果综合分析结果综合分析判断。 {{Hierarchy footer}} {{临床基础检验学图书专题}}
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