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{{Hierarchy header}} [[沙眼衣原体]]是(chlamydia trachomatis,[[CT]])是一种在人体内长期生存并又广泛传播的[[病原体]],属[[条件致病菌]]。它在一定条件下能引起[[子宫颈感染]]、[[早产]]、[[流产]]及[[尿道感染]]等多种[[疾病]],尤其是在与[[淋球菌]]等其他病原体合并[[感染]]时更加重疾病的发展及引起其它[[并发症]],在无症状[[子宫颈]]和男、女性[[泌尿系统]]常有沙眼衣原体的存在,其检出率不一。至今,西方国家已有10-20%的人口感染有沙眼衣原体,特别是性接触而传播其[[感染率]]更高,成为目前医学所关注的重大问题之一。最近,在对我国大陆性乱人群进行检查时发现,有相当多的人其[[泌尿生殖系统]]感染有CT,并已构成我国[[性传播疾病]](STDs)。 '''一、[[病原学]]''' [[衣原体]]是一类能通过[[细胞]]滤器,有独特发育周期、严格[[细胞内寄生]]的[[原核细胞]]型[[微生物]]。具有以下特点(1)具有[[DNA]]和[[RNA]]两种类型的[[核酸]];(2)[[二分裂]]方式繁殖,发育周期特别;(3)[[细胞壁]]成份中含有[[肽聚糖]];(4)含有[[核蛋白体]];(5)对多种[[抗生素]]都敏感。衣原体广泛[[寄生]]于人类,哺乳动物及鸟类,仅少数有[[致病性]]。只有沙眼衣原体和[[鹦鹉热]]衣原体可以引起人类疾病。 目前已知衣原体有15种[[血清型]]。A、B、Ba、C血清型主要引起眼疾患,D-K型引起[[生殖器]]疾患,L1-L3型为引起性病淋巴性[[肉芽肿]]的病原体。它们严格称细胞内寄生微生物,大小约300-400μm,在细胞内生长繁殖,有特殊的发育周期,感染力为基本小体,[[增殖]]力为网状体,在电镜下可见[[胞膜]]呈[[有丝分裂]]繁殖。 衣原体对热敏感,56℃-60℃仅能存活5-10分钟,在-70℃可保存数年。0.1%[[甲醛]]液、0.5%石碳酸可将衣原体在短期内杀死,75%[[乙醇]]杀灭力很强,半分钟即有效,对[[利福平]]、[[四环素]]、[[红霉素]]均敏感。 '''二、[[流行病学]]''' 近年来各种报道显示,[[淋菌性尿道炎]][[发病率]]下降,而非淋菌性尿道炎却不断上升,居STDs的首位。其中CT感染所致的病例显著增加,如美国报道[[非淋菌性尿道炎]]约半数为CT所致,在[[淋病]]中有20-40%从病灶中分离出CT,另据报道男性非淋菌性尿道炎在世界急剧上升,以美国为例、一年间就300万人患本症。女性[[宫颈炎]]等,在[[女性生殖器]][[感染症]]中CT也是其主要的[[病原菌]]。 男性非淋菌性尿道炎最常见的病原菌是沙眼衣原体。在美国异性恋男性中沙眼衣原体阳性率达40%,每年约有60万男性患者呈持续性或复发性NGU,同时发现沙眼衣原体宫颈炎妇女其男性性伴侣的感染率为42%,患衣原体[[尿道炎]]的男性其女性性伴侣的感染率为62%,无症状的沙眼衣原体感染在性活跃的男人间传播率更高。 引起男性[[不孕症]]的因素很多,但最近发现从无生殖力的脓性[[精液]]及男子[[性腺]]活检[[标本]]中分离出沙眼衣原体,进一步提示和证明了沙眼衣原体引起男性不孕症的可能性。有人对淋病感染症的男性患者进行观察,发现体内有高效价的抗衣原体[[抗体]],衣原体阴性淋菌尿道炎者亦有高价抗衣原体抗体,并发现65-85%的非淋菌性[[后尿道]]炎是由沙眼衣原体引起。 [[附睾炎]]是男性NGU最主要的并发症,在年轻的性活跃的男性附睾炎患者中,45-60%是由沙眼衣原体引起。大多数病人有[[尿道]][[症状]]或[[体征]],尿道标本和[[附睾]]吸取液中可分离到衣原体。 沙眼衣原体性子宫颈炎在女性[[衣原体感染]]中最多。因为感染只发生于子宫颈的柱状[[上皮]],而不感染[[阴道]]的[[鳞状上皮]],故不造成[[阴道炎]]。英国去性病[[门诊]]就医的妇女[[衣原体培养]]阳性率为20-30%,微量[[免疫荧光]]法检测[[血清抗体]]达60%。淋病患者的宫颈炎标本衣原体阳性率为30-35%,伴不典型宫颈炎或无症状衣原体宫颈感染为3-5%,说明衣原体[[隐性感染率]]和混和型感染率相当高,对宫内[[避孕]]器的应用者进行测定,发现由避孕器引起的[[盆腔炎]]症中大部分是由衣原体感染所致。在男性NGU患者配偶的宫颈中有30-60%分离出衣原体。在与感染的男性[[性交]]后约33-49%的宫颈衣原体感染的阳性患者并不表现任何症状,但持续存在于宫颈基层[[上皮细胞]]内的衣原体[[抗原]]可干扰[[宿主]]细胞DNA使之发生恶变。 '''研究表明''',在[[腹腔镜]]直视下采取受侵[[输卵管]]液检查中发现衣原体阳性率在30%左右、并发现,有40%左右的[[输卵管炎]]是由沙眼衣原体引起的,且衣原体感染的孕妇容易发生流产,而流产后多数又引起输卵管炎。许多临床衣原体感染的妇女数年后出现[[不孕]]或[[宫外孕]]、并发现输卵管梗阻所致宫外孕,宫外孕和生育力低下者中沙眼衣原体抗体阳性占81%。 '''沙眼衣原体'''的感染可引起男、女性急性尿路[[综合症]],在发达国家,沙眼衣原体引起的女性尿道炎的趋势正在不断地增加,并且正在年轻化,应引起全社会的关注。 我国沙眼衣原体感染属于近年的事,由于临床上较多的[[泌尿生殖系]]感染查不出病因,故引起专家们对衣原体感染的临床研究。从1989年我国从14例性乱妇女宫颈标本中分离培养出沙眼衣原体以来,越来越多的研究表明在性活跃期的性乱及正常家庭中,沙眼衣原体的泌尿生殖道感染率在5-25%之间,特别是家庭成员之间的传播更应引起重视,不少儿童性NGU是由沙眼衣原体的感染引起的。 '''三、[[传播途径]]''' 男性非淋菌性尿道炎约30-70%可通过性交传染给女性,反之亦有25-50%患有[[衣原体性宫颈炎]]的女性经性交亦可传给男性。[[新生儿]]由母体[[垂直感染]],发生衣原体性[[结膜炎]],有10-20%发生[[肺炎]],女性感染CT还有由宫颈炎上升而并发腹腔内诸器宫感染。由于“口交”亦能引起[[口腔]]内衣原体感染。另外,由宫颈、输卵管处分离出CT的事实,也可说明其传播途径。 应该说明一点:当今有些所谓NGU与性行为并无关系,如[[医源性感染]](尿道插管、[[膀胱镜]]以及[[外伤]]或[[化学]]性刺激等)。还有所谓NGU并非是由衣原体性微生物所致,在含义上应该与NGU加以区别,因为病原体不同,而传播途径也有所不同,故医生在诊治中要心中有数。 '''四、发病机理与[[免疫]]''' 衣原体感染人体后,首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖,然后进入[[单核巨噬细胞系统]]的细胞内增殖。由于衣原体在细胞内繁殖,导致感染[[细胞死亡]],同时尚能逃避宿主[[免疫防御]]功能,得到间歇性保护。衣原体的[[致病机理]]是抑制被感染细胞[[代谢]],溶解破坏细胞并导致溶解酶释放,代谢产物的[[细胞毒]]作用,引起[[变态反应]]和[[自身免疫]]。 当人体感染衣原体后,产生特异性的免疫,但是这种免疫力较弱,持续时间短暂,因此,衣原体感染容易造成持续,反复感染,以及[[隐性感染]]。[[细胞免疫]]方面,大部分活动性已治愈的衣原体患者,给予相应的抗原[[皮内注射]]时,常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用[[淋巴细胞]]进行[[被动转移]]。此种[[免疫性]]很可能是T细胞所介导。[[体液免疫]]方面,在衣原体感染后,在[[血清]]和局部分泌物中出现[[中和抗体]]。中和抗体可以阻止衣原体对宿主细胞的吸附,也能通过调理作用增强[[吞噬细胞]]的摄入。 '''五、[[临床表现]]''' (一)男性[[衣原体性尿道炎]](chlamydia urethritis,CU) 又称为非淋菌性尿道炎(NGU)。是由衣原体感染引起的非急性化脓性尿道粘膜炎性病变。目前已成为STDs中最常见的一种。 本病[[潜伏期]]比淋病长,约1-3周或数月,主要表现为尿道内不适,刺痛及烧灼感,并伴有不同程度的[[尿频]]、[[尿急]]、[[尿痛]],尿痛较淋病为轻。尿道口轻度[[红肿]]并有浆液或粘液脓性分泌物,稀薄而量少,长时期不[[排尿]]或早晨首次排尿前可见尿道口分泌物污染内裤,并可见尿道口有“糊口”现象;分泌物少时,于晨起挤压尿道才流出少量粘液。合并[[膀胱炎]]时可有[[血尿]];无症状性非淋菌性尿道炎,约30-40%病人症状不典型或根本无症状。约1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原体感染,淋病治愈后又出现尿道炎症状,易误诊为慢性淋病或PPNG[[菌株]]感染。 沙眼衣原体感染易并发附睾炎,表现为附睾肿大,变硬及触痛,多为单侧,部分患者的抗沙眼衣原体抗体升高,可直接从附睾抽吸液中分离出沙眼衣原体;累及[[睾丸]]可出现[[睾丸炎]],表现为[[睾丸疼痛]]、触痛、[[阴囊水肿]]及[[输精管]]变硬变粗;累及[[前列腺]]时可出现后尿道、[[会阴]]及[[肛门]]部位[[钝痛]]或触痛,可有性[[功能障碍]],直肠镜检可触及有[[压痛]]的前列腺。如前列腺明显肿大,可压迫后尿道而出现尿流变细、排尿[[无力]]及[[尿流中断]]等;本病还可以合并[[Reiter综合征]],即[[关节炎]],结膜炎,尿道炎三联症。 (二)女性生殖系统[[衣原体感染症]] 女性感染衣原体不限于尿道,可累及整个泌尿生殖器官,此类感染常因缺乏自觉症状或症状轻微而忽视了治疗,造成[[传染源]]而扩散,形成危害。 女性衣原体感染比男性感染引起的症侯要多,其主要感染部位为宫颈,由此垂直感染给新生儿,以至发生PID等,其后遗症多导致不孕症。 无症状感染(缺乏症状反应):由于本病缺乏自觉症状,则局部病象便成为诊断的一个重要指标,表现为阴道有脓样分泌物,亦可为粘液或浆液性。分泌物量较多(为中等量),稍有臭味。阴道粘膜为正常颜色,但常伴有[[宫颈糜烂]]。 衣原体性宫颈炎:当伴发宫颈炎时、宫颈发红,有浆液或脓性分泌物增加、阴道内[[糜烂]]扩大,易于[[出血]]等症状。[[镜检]][[下阴]]道分泌物的所谓“[[阴道清洁度]]”多为III度以上。沙眼衣原体主要侵犯宫颈的柱状上皮细胞,而磷状上皮细胞常不被侵犯,故阴道,宫颈局部没有改变。 宫颈炎的主要症状是[[白带]]增多,不时出血及小腹部疼痛等一般症状,无特异性表现,多因其性伴患有尿道炎而来院就诊。 衣原体性输卵管炎,本症多由宫颈炎并发引起。用腹腔镜直接从输卵管抽吸物标本中,约30%以上检测出衣原体,病情经过多数较轻、下腹部可有轻微疼痛,一般[[体温]]不高,但[[血沉]]稍快。由于这种非典型经过,使病人拖延就医,往往引起[[子宫]]附件损害,形成输卵管炎的[[后遗症]],其最主要表现是输卵管性不孕症。 盆腔炎(PID):PID不是固定疾患的用语,凡在[[盆腔]]内感染症,如宫内感染,输卵管炎等[[附件炎]]症波及盆腔腹膜特定的部位感染均可称之为PID,由CT引起的PID主要是由宫颈炎上行感染所致。其主要表现是[[急腹症]]型。 部分患者可导致宫外孕、流产、不孕、[[死胎]]及新生儿死亡。有些病人除不孕外,可无任何症状。也可通过产道传染,引起[[婴儿]][[眼结膜]]炎、[[鼻炎]]、[[中耳炎]]、肺炎及阴道炎等。 '''六、诊断与鉴别诊断''' 诊断衣原体性疾患,目前在我国尚未普及,因此,往往漏诊,所以应当重视临床表现,争取做到化验室检测指标求得确诊。 患者来就医时,男性[[主诉]]常常是尿道疼,不适感或从外尿道流出脓样粘液,或因患“淋病”久治不愈,反复出现上述现象;女性病人常常无症状,只是白带多或因其丈夫有“淋病”史,特意来检查确诊。 (一)临床症状 首先应排除淋菌性尿道炎 衣原体性尿道炎与淋菌性尿道炎鉴别 {| class="wikitable" | 临床[[病症]] | 沙眼衣原体 | 淋球菌 |- | 潜伏期 | 1-3周 | 2-5日 |- | 发病 | 缓慢 | 突然 |- | 尿路刺激征 | 轻或无 | 多见 |- | [[全身症状]] | 无 | 偶见 |- | 尿道分泌物 | 少或无,粘液性或浆液性稀薄 | 常见,量多呈脓性 |- | 无症状[[带菌者]] | 相当多 | 有,但不多 |- | [[白细胞]]内G-[[双球菌]] | (一) | (+) |- | 病原菌培养 | 沙眼衣原体 | 淋球菌 |} (二)[[实验室诊断]] 检测出病原体或病原体特异性DNA是诊断本病唯一标准,近年来由于对CT直接分离培养成功,加之[[基因诊断]]技术在CT诊断方面的成功应用,使过去认为难以诊断的疾患已提高到最易诊断的一种疾患,但是上述两项技术特殊,对操作人员及实验设备要求严格,在一般[[医院]]实行起来尚难完成。一般只用CT抗原法进行诊断。 1.衣原体[[细胞培养]]:对沙眼衣原体敏感的[[细胞株]]为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经[[放线菌酮]]处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆[[荧光抗体]][[染色]],可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。 2.衣原体[[细胞学]]检查法:在感染细胞内可有衣原体的[[包涵体]]存在。从感染部位采取细胞标本作[[涂片]],姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色,碘染色显示褐色。但敏感性差(40%),目前已较少采用。 近年来采用[[荧光素]]标记的抗衣原体[[单克隆抗体]],来检测细胞涂片中的衣原体,使用较为方便,目前主要用衣原体[[外膜]][[蛋白]](MOMP)的单克隆抗体的商品[[试剂]](Mico Trak,Pathfinder,Monofluor)。结果判断:要衣原体数>10个才能判为阳性。 3.PCR检测衣原体DNA: (1)标本的处理: ①取材部位为[[子宫颈管]],男性为尿道,将[[灭菌]]白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右,转动数圈,停留约30s,取出后置标本[[缓冲液]]中。 ② 衣原体DNA提取: 将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5% NP-40、0.5%Tween 20,1% SDS和2mg/ml [[蛋白酶]]K的TES缓冲液(50mmol/L Tris-HCl,50mmol/l NaCl,100mmol/L EDTA,pH 8.0)置37℃裂解60min,沸水5min,酚、[[氯仿]]抽提DNA,乙醇沉淀,沉淀物溶于20μlTE缓冲液(100mmol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA,pH 8.0)。 (2)[[引物]]设计: 引物对选自衣原体16SrRNA[[基因]],为衣原体属特异性,以DNA合成仪固相亚磷酸三酯合成并[[纯化]]。引物对的序列分别为5′GTGGATAGTCTCAACCCTAt 3′(16SrRNA[[基因位点]]832-851)和5′TATCTGTCCTTGCGGAAAAC3′([[位点]]1041-1022)。目的[[扩增]]片段(832-1041)长210bp。 (3)PCR扩增: 传统的方法反应体积为100μl,含5x反应缓冲液20μl和FD-DNA[[聚合酶]]2U、4种dNTP各200μmol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0.5ml[[离心管]],-20℃备用。临用加模板DNa 2μl,短暂离心,加100μl矿物油覆盖。现在试剂已商品化,反应体积为25μl,单管已分装好,只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s(第一次循环变性2min),55℃退火30s和72℃延伸40s(最后一次循环72℃,延伸5min)三个步骤。每次扩增均应作[[阴阳]]性对照。 (4)扩增产物的检测 ① 1.5%[[琼脂糖凝胶电泳]]检测:取10u l PCR扩增物作1.5%琼脂糖凝胶电泳、0.5μg/ml溴化乙锭染色,以PGEM-3Zf(+)DNA-Hae Ⅲ为[[分子量]]标准,置紫外透射仪观察结果。 ② [[生物素]][[寡核苷酸探针]]的检测 a.[[探针]]序列及合成:探针序列为5′ACTCAA-AAGAATTGACGGGGGCCCGCACAa3′(30mer),衣原体16Sr RNA基因中的位点为909-938,与PCR扩增片段中间序列互补。以DNA合成仪固相亚磷酸三酯法合成并纯化。 b.标记:按Riely等方法略有修改。以末端[[脱氧核糖核酸]][[转移酶]](TdT)[[催化]]Bio-11-dUTP标记到合成的寡核苷酸探针片段3′-OH端。反应体系含:140mmol/L二[[甲胂酸钠]],30mmol/l Tris-HCl(pH 7.6),100μmol/L Bio-11-dUTP,0.1μmol/L [[寡核苷酸]]片段,0.05%BSA,300U/mlTdT。于37℃保温3h后,加10mmol/LEDTA终止。寡核苷酸片段探针标记后,将标记探针(1ng/μl)作2倍[[系列稀释]],取5μl点膜,封闭后显色。结果探针经32倍稀释(最高稀释度5ng)后仍呈现明显的显色反应,证实探针的标记以及显色效应良好。 c.DNA[[斑点杂交]]:提取的DNA或其PCR扩增产物0.5mol/l NaOH变性20min,取5μl点于[[硝酸]]纤维素膜,烘干;以6×SSC(1xSSC为:0.15mol/l NaCl,0.015mol/L[[柠檬酸]]三钠,pH 7.0)浸泡2次,80℃干烤2h。置6×SSC,5×Denhardt液,0.2%SDS,50μg/ml变性牛[[胸腺]]DNA,10mmol/l EDTA中于55℃杂交3h后,加入终浓度为150μg/ml的探针,于55℃杂交过夜。以2×SSC-0.1%SDS室温漂洗3次,每次min。 d.显色:将杂交漂洗后的滤膜浸泡于0.1mol/l Tris-HCl (pH7.5),0.15mo l/L NaCl,0.05%Tween20,0.05%%TritonX-100,2%BSA中,37℃封闭6min;置4μg/ml[[亲和素]]的缓冲液A(0.1mol/l Tris-HCl,0.15mol/LNaCl,pH 7.5)中,37℃孵育30min,缓冲液A漂洗3次;再置于含1μg/ml生物素化[[碱性磷酸酶]]的缓冲液A中,37℃作用30min,缓冲液A漂洗2次,缓冲液B(0.1mol/lTris-HCl,0.1 mol/L NaCl,50 mmol/L MgCl2,pH 9.5)漂洗2次。最后将膜泡于含0.1mg/ml[[磷酸]]萘酚AS-MX和0.6mg/ml坚固蓝RR的缓冲液B中,暗处显色30min。 PCR扩增衣原体DNA有十分高的特异性及敏感性,结合生物素标记的衣原体寡核苷酸探针作DNA斑点杂交。可作为衣原体诊断的[[金标准]],其敏感度可以检测相当于1个拷贝的衣原体DNA[[分子]]。 '''七、治疗''' 衣原体对作用于细胞壁的药物[[耐药]],如[[青霉素类]]、[[万古霉素]]、[[杆菌肽]],对于抑制膜蛋白和胞浆[[蛋白合成]]药物敏感,如四环素、红霉素等。 治疗方案 首先[[四环素类]],四环素500mg每日4次,连服7天,或用[[强力霉素]]100mg每日2次,连服7日。对四环素禁用或[[耐受性]]差的患者,可改服红霉素500mg,每日4次,连服7日,[[复方新诺明]]亦有效。 另外近年来新开发的对各领域的感染症广泛使用的新药[[喹诺酮类]],在治疗衣原体方面临床效果较好,其中常用的药物有[[氧氟沙星]](OFIX),[[环丙沙星]](CPFX),[[洛美沙星]],利福平治疗效果也较好。 治疗中应注意的问题: (1)[[四环素类药物]]对[[妊娠]]妇女有致畸作用,故应禁用。 (2)从目前临床观察来看用[[喹诺酮类药物]]比应用四环素类药物为好,因为患者多数有淋球菌或其它合并感染。 (3)治疗时间2-3周为宜。衣原体繁殖周期为48-72小时,寄生在细胞内,药物渗入细胞内的浓度一般较低。所以治疗时间需要长些。 (4)在男女感染后无症状或症状轻微者,可视为带菌者,应接受正规治疗。对患者的性伴要同时治疗。 (5)[[联合用药]]:四环素类+喹诺酮类 红霉素类+喹诺酮类 四环素类+利福平 喹诺酮类+利福平 ==参看== *[[衣原体感染症]] {{Hierarchy footer}} {{基因诊断与性传播疾病图书专题}}
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